pAb di coniglio Phospho-JAK2-Y1008 per WB, ELISA - O60674

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di JAK2

• Identità e famiglia proteica: La tirosina-proteina chinasi JAK2 (Janus chinasi 2) è una proteina tirosina chinasi non recettoriale che svolge un ruolo centrale nella segnalazione delle citochine e dei fattori di crescita. Contiene un dominio chinasico, un dominio pseudochinasico e un dominio SH2, ed è attivata dall'autofosforilazione in residui chiave, tra cui Y1008. Riferimenti correlati: PMID:7615558
• Meccanismo di trasduzione del segnale: In seguito al legame del ligando ai recettori delle citochine di tipo I o di tipo II, JAK2 fosforila specifici residui di tirosina sulle code citoplasmatiche del recettore, creando siti di attracco per i fattori di trascrizione STAT. JAK2 quindi fosforila le STAT, che dimerizzano e traslocano nel nucleo per regolare l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:15690087, PMID:9618263
• Regolazione dell'eritropoiesi: JAK2 è essenziale per la segnalazione dell'eritropoietina (EPO). Il legame dell'EPO induce l'autofosforilazione e l'attivazione di JAK2, portando alla fosforilazione di EPOR, al reclutamento di STAT5 e all'attivazione dei geni necessari per l'eritropoiesi. Riferimenti correlati: PMID:9657743
• Modificatore della cromatina: Nel nucleo, JAK2 fosforila l'istone H3 sulla tirosina-41 (H3Y41ph), che sposta la proteina dell'eterocromatina HP1α (CBX5) dalla cromatina, influenzando così l'espressione genica e la struttura della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:19783980
• Localizzazione subcellulare: JAK2 si trova nel citoplasma, associata al sistema endomembranoso, e nel nucleo, riflettendo i suoi molteplici ruoli nella trasduzione del segnale e negli eventi nucleari.
• Espressione ubiquitaria: JAK2 è espressa ubiquitariamente nella maggior parte dei tessuti, coerentemente con i suoi ruoli fondamentali nella crescita cellulare, nel differenziamento e nell'immunità.
• Altre interazioni chiave: JAK2 collabora con la chinasi TEC, modula CDKN1B per regolare il ciclo cellulare e partecipa alle vie di segnalazione dell'oncostatina-M e del CNTF. Riferimenti correlati: PMID:21423214, PMID:9188471, PMID:11294841
• Rilevanza clinica: Come proto-oncogene, le mutazioni di guadagno di funzione di JAK2 (es. V617F) sono associate a malattie mieloproliferative. Le parole chiave lo collegano anche all'immunità adattativa e innata, al riarrangiamento cromosomico e alla coniugazione dell'ubiquitina.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico che comprende il sito di autofosforilazione Y1008. Questo sito è critico per l'attivazione della chinasi JAK2; assicurarsi che il rilevamento rifletta lo stato di fosforilazione del target includendo controlli appropriati (es. trattamento con λ‑fosfatasi).
• Si raccomanda il Western blot; il peso molecolare previsto di JAK2 è 131 kDa. Utilizzare un tampone di bloccaggio fresco e verificare la specificità della banda tramite competizione con il peptide non fosforilato.
• Confermare la reattività crociata con il proprio sistema di campioni umani specifico. Per l'ELISA, considerare il rivestimento con il fosfopeptide e la convalida con lisati cellulari noti attivati da JAK2.
• Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento e conservare come raccomandato (spedizione in borsa del ghiaccio) per preservare l'attività dell'anticorpo.

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