Anticorpo policlonale di coniglio Phospho-LAT-Y171 per WB ed ELISA - O43561

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LAT

• LAT (Linker for activation of T-cells) è una proteina adattatrice transmembrana di 36–38 kDa essenziale per accoppiare l'attivazione del recettore dell'antigene alle cascate di segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:23514740 PMID:25907557
• Agisce come un'impalcatura centrale in seguito alla stimolazione del TCR, reclutando PLCG1, GRB2, GRAP2 e altre molecole per guidare il flusso di calcio, l'attivazione di MAPK e la riorganizzazione del citoscheletro.
• Oltre che nelle cellule T, LAT funziona nella segnalazione mediata da FCGR3 nelle cellule natural killer e nella degranulazione mediata da FCER1 nei mastociti, evidenziando il suo ruolo in molteplici vie effettrici immunitarie.
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare tramite un'unica elica transmembrana e subisce modificazioni lipidiche, inclusa la palmitoilazione, che sono critiche per il targeting ai lipid rafts e la formazione di microcluster di segnalazione.
• L'estesa fosforilazione della tirosina—in particolare in Y171—funge da sito di ancoraggio per gli adattatori della famiglia GRB2, rendendola un nodo chiave nel signalosoma del TCR.
• Nell'uomo, LAT è espressa prevalentemente nel timo, nelle cellule T, nelle cellule NK e nei mastociti, con una debole espressione nella milza; è non rilevabile nelle cellule B.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un peptide fosforilato comprendente la tirosina 171; utilizzare appropriati inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare l'epitopo fosforilato.
• Per il western blot, includere un controllo di blocco con peptide non fosforilato per confermare la specificità per la fosforilazione e validare il rilevamento in lisati di cellule T stimolate vs. a riposo (es. cellule Jurkat ± anti-CD3).
• In ELISA, l'immunogeno fosfopeptidico sintetico può essere utilizzato come antigene in fase solida; considerare l'uso di una controparte non fosforilata per sottrarre la reattività di fondo.
• La reattività incrociata con altre specie non è stata stabilita; validare la reattività nel sistema campione previsto prima dell'uso di routine.

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