Phospho-LCK-Y394 Rabbit pAb - P06239

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di LCK

• LCK è una tirosina chinasi proteica non recettoriale essenziale per la selezione delle cellule T, la maturazione nel timo e la funzione delle cellule T mature.
  Riferimenti correlati: PMID:2470098
• A seguito dell'ingaggio del recettore delle cellule T (TCR) con il complesso peptide-MHC, LCK viene reclutata nel complesso TCR-CD3 e fosforila i residui di tirosina all'interno degli ITAM delle catene CD3 e TCR, innescando il reclutamento di ZAP70 e la produzione a valle di linfochine.
  Riferimenti correlati: PMID:2470098 PMID:40592325
• LCK partecipa anche alla segnalazione tramite i recettori CD2 e IL2: l'associazione con CD2 porta all'iperfosforilazione di LCK e il legame di IL2 potenzia l'attività di LCK per promuovere la proliferazione delle cellule T.
• Fosforila molteplici substrati tra cui RUNX3, PTK2B/PYK2, MAPT, RHOH e TYROBP, e interagisce con FYB2.
  Riferimenti correlati: PMID:27335501
• Si localizza alla membrana cellulare, al citoplasma e al citosol.
• Espresso specificamente nelle cellule linfoidi.
• Annotato con parole chiave come splicing alternativo, legame dell'ATP, chinasi, fosfoproteina, proto-oncogene, domini SH2 e SH3, e lipidazione (miristato e palmitato), riflettendo la sua regolazione multifaccettata.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico attorno a Tyr394, quindi ci si aspetta che l'anticorpo riconosca specificamente LCK fosforilata in questo sito dell'anello di attivazione.
• Per WB, utilizzare inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione. È prevista una banda a ~58 kDa nei lisati di cellule linfoidi umane e murine.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo in modelli di cellule T appropriati (es. cellule Jurkat) stimolati tramite CD3/CD28 per indurre una robusta fosforilazione di Tyr394.
• IF/ICC potrebbe richiedere una fissazione/permeabilizzazione ottimizzata; considerare i test su cellule T attivate o sezioni di tessuto timico.

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