Anticorpo policlonale rabbit Phospho-Lck-Y505 per WB, IP, ELISA - P06239

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Lck

• La tirosina-proteina chinasi Lck (p56-LCK) è una tirosina chinasi non recettoriale della famiglia Src, essenziale per la selezione e la maturazione delle cellule T in via di sviluppo nel timo e per la funzione delle cellule T mature. Riferimenti bibliografici: PMID:2470098
• Lck svolge un ruolo chiave nella trasduzione del segnale collegata al recettore dell'antigene delle cellule T (TCR). È associata costitutivamente alle code citoplasmatiche dei corecettori CD4 e CD8 e, dopo l'attivazione del TCR, fosforila i motivi ITAM nel complesso TCR-CD3, avviando la segnalazione. Riferimenti bibliografici: PMID:2470098
• Una volta attivata, Lck fosforila e attiva la chinasi a valle ZAP70, portando al reclutamento di molecole di segnalazione e alla produzione di linfochine. Riferimenti bibliografici: PMID:2470098
• Lck contribuisce anche alla segnalazione tramite altri recettori, tra cui l'iperfosforilazione mediata da CD2 e la via del recettore IL2, che controlla la proliferazione delle cellule T. Riferimenti bibliografici: PMID:2470098
• Altri substrati di Lck includono RUNX3, PTK2B/PYK2, MAPT, RHOH e TYROBP; interagisce inoltre con FYB2. Riferimenti bibliografici: PMID:27335501
• Lck si localizza sulla membrana cellulare e nel citoplasma (citosol); è espressa specificamente nelle cellule linfoidi.
• Le modifiche post-traduzionali includono miristoilazione e palmitoilazione N-terminale per l'ancoraggio alla membrana, e fosforilazione regolatoria su tirosine chiave, inclusa Y505 (inibitoria). Contiene domini SH2 e SH3 ed è classificata come proto-oncogene e chinasi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'anticorpo è ottenuto contro un fosfopeptide sintetico corrispondente alla regione Y505 di Lck umana; è progettato per riconoscere specificamente Lck fosforilata in Y505.
• Per Western blot (WB), si consiglia di utilizzare lisati di cellule o tessuti da linee di cellule T umane (es. Jurkat) con opportuni inibitori di fosfatasi per preservare la fosforilazione. È attesa una banda intorno a 58 kDa.
• L'immunoprecipitazione (IP) può richiedere l'ottimizzazione della concentrazione di anticorpo e delle condizioni del buffer di lisio; verificare le proteine eluite tramite WB.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per rilevare Phospho-Lck-Y505 in saggi basati su peptidi; le condizioni di rivestimento della piastra e di rilevamento devono essere determinate empiricamente.
• Convalidare sempre l'anticorpo nel sistema di campionamento e nel contesto applicativo pertinenti, poiché le prestazioni possono variare in base alle condizioni sperimentali.

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