Anticorpo Policlonale di Coniglio Fosfo-MAP2K1-S217/MAP2K2-S221 per WB, ELISA - Q02750 / P36507

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MAP2K1/MAP2K2 (MEK1/MEK2)

• MAP2K1 (MEK1) e MAP2K2 (MEK2) sono proteine chinasi a doppia specificità che fungono da componenti essenziali della via di trasduzione del segnale delle MAP chinasi, specificamente della cascata MAPK/ERK.
• In seguito a stimolazione extracellulare, RAS attiva RAF1, che a sua volta fosforila e attiva MAP2K1/2 sui residui di serina conservati (S217 in MEK1, S221 in MEK2), innescando la fosforilazione a valle di ERK1/2 su un motivo Thr-Glu-Tyr.
• ERK1/2 attivati si traslocano quindi nel nucleo per regolare i fattori di trascrizione, controllando processi come crescita cellulare, adesione, sopravvivenza, differenziazione, metabolismo e riarrangiamenti del citoscheletro.
• MAP2K1 partecipa anche all'attivazione BRAF dipendente da KSR1/2 promuovendo la dimerizzazione KSR-BRAF, che rilascia interazioni inibitorie e potenzia l'attività chinasica di BRAF. Riferimenti correlati: PMID:29433126
• La cascata MAPK/ERK influenza la dinamica endosomiale, l'elaborazione dei lisosomi e la frammentazione del Golgi durante la mitosi, mediata in parte dalla localizzazione subcellulare di MAP2K1 nel citoplasma, nel centrosoma, nel polo del fuso, nel nucleo e nella membrana.
• MAP2K1 è ampiamente espresso nei tessuti umani ma mostra livelli estremamente bassi nel cervello, in linea con il suo ruolo ubiquitario nella segnalazione mitogenica.
• Le principali modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione nei siti attivanti, acetilazione e mutazioni associate a malattie legate a cardiomiopatia, displasia ectodermica e disabilità intellettiva (secondo le parole chiave UniProt).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato che comprende S217 di MAP2K1 e S221 di MAP2K2, suggerendo che l'anticorpo riconosca preferenzialmente le forme attivate (fosforilate) di MEK1/2.
• Per il Western blot, preparare lisati da cellule private di siero e stimolate con fattori di crescita (es. EGF, insulina) per indurre una robusta fosforilazione di MEK1/2; validare la specificità confrontando con anticorpi totali MEK1/2 o trattando i campioni con fosfatasi lambda.
• I pesi molecolari attesi sono ~40–44 kDa per MAP2K1 e ~45 kDa per MAP2K2; lo splicing alternativo può produrre bande aggiuntive.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento, ma la diluizione ottimale e l'abbinamento devono essere determinati empiricamente nel sistema di saggio finale.

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