mAb coniglio anti Phospho-MDM2-S166 per IHC-P e ELISA - Q00987

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MDM2

• MDM2 è una ubiquitina-proteina ligasi E3 che media l'ubiquitinazione di p53/TP53, determinandone la degradazione proteasomiale e inibendo l'arresto del ciclo cellulare e l'apoptosi mediati da p53 e p73/TP73.
  Riferimenti correlati:
  PMID:29681526
• Ubiquittina inoltre e promuove la degradazione di altri soppressori tumorali e proteine di segnalazione, tra cui RB1, DAXX, IGF1R e SNAI1.
  Riferimenti correlati:
  PMID:12821780
  PMID:15053880
  PMID:15195100
• MDM2 regola negativamente la respirazione mitocondriale legando NDUFS1, causandone la ritenzione citosolica, una ridotta attività del complesso I, stress ossidativo e apoptosi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:30879903
• Localizzato prevalentemente nel nucleo (nucleoplasma e nucleolo), con un'ulteriore distribuzione nel citoplasma.
• Espresso ubiquitinario nei tessuti normali; isoforme specifiche del cancro (da Mdm2-A a Mdm2-G) sono rilevate in diverse neoplasie maligne.
• La fosforilazione sulla serina 166 e altri residui regola l'attività di MDM2 e le sue interazioni proteina-proteina.
• Contiene un dominio a dito di zinco di tipo RING e appartiene alla famiglia delle ubiquitina coniuganti enzimi; richiede zinco per la sua funzione di ligasi E3.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico fosforilato che circonda la S166; riconosce specificamente la forma fosforilata di MDM2. Validare lo stato di fosforilazione con controlli di trattamento con fosfatasi.
• Per IHC-P, si consiglia di considerare il recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato) e di validare l'intensità della colorazione in campioni di tessuto noti per avere livelli elevati di Phospho-MDM2 (ad esempio, alcuni tumori).
• Per ELISA, ottimizzare le condizioni di coating e la diluizione dell'anticorpo tramite titolazione a scacchiera, e includere controlli di peptide sia fosforilato che non fosforilato per confermare la specificità.
• La reattività crociata con topo e ratto è stata documentata; verificare il segnale nei campi della specie corrispondente utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.

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