Phospho-MDM2-S260 Coniglio pAb per WB, ELISA - Q00987

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MDM2

• MDM2 è una ligasi E3 ubiquitina-proteica che mira principalmente a p53/TP53 per l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomiale, inibendo l'arresto del ciclo cellulare e l'apoptosi mediati da p53. Riferimenti correlati: PMID:29681526
• Ubiquitina anche altri substrati tra cui IGF1R, SNAI1, DYRK2 e DCX, regolando processi come la degradazione del recettore, lo sviluppo neuronale e la migrazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12821780, PMID:15053880, PMID:15195100
• MDM2 regola negativamente NDUFS1, portando a una ridotta respirazione mitocondriale, aumento dello stress ossidativo e impegno verso la via mitocondriale dell'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:30879903
• A livello subcellulare, MDM2 si trova nel nucleo, nucleoplasma, citoplasma e nucleolo, spostandosi tra i compartimenti per esercitare le sue diverse funzioni.
• MDM2 è una fosfoproteina con un dominio dita di zinco di tipo RING; la fosforilazione in più siti, incluso S260, può modularne l'attività, la stabilità e le interazioni con p53 e altri partner.
• In modo specifico per tessuto, MDM2 è espresso in modo ubiquitario, ma alcuni isoforme di splicing (Mdm2-A fino a -G) si osservano in una gamma di tumori mentre sono assenti nei tessuti normali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Utilizzare inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione in S260.
• Per il WB, considerare il blocco con peptide non fosforilato o il trattamento dei campioni con fosfatasi per confermare la specificità per la fosforilazione.
• Convalidare l'anticorpo in linee cellulari o tessuti umani con noto stato di espressione e fosforilazione di MDM2 (ad es., cellule tumorali con p53 wild-type sotto stress genotossico).
• Per l'ELISA, assicurarsi che il sistema di cattura e rilevamento mantenga l'epitopo fosforilato ed evitare incubazioni prolungate che potrebbero portare a defosforilazione.

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