Anticorpo Monoclonale di Coniglio Fosfo-MEK1-T292 per WB, ELISA - Q02750

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MEK1

• MEK1 (MAP2K1) è una proteina chinasi a doppia specificità essenziale per la via di segnalazione MAPK/ERK, catalizzando la fosforilazione dei residui di treonina e tirosina in ERK1/2 (MAPK3/1) per propagare i segnali a valle.
• Opera a valle di RAS e RAF1, trasducendo segnali da fattori di crescita, citochine e ormoni per controllare crescita, adesione, sopravvivenza e differenziazione cellulare.
• MEK1 promuove anche l'attivazione di BRAF associandosi con le proteine scaffold KSR1 o KSR2, un meccanismo che allevia l'auto-inibizione e migliora la dimerizzazione. Riferimenti correlati: PMID:29433126
• La proteina si localizza in molteplici siti subcellulari, incluso citoplasma, centrosoma, polo del fuso, nucleo e membrana, facilitando la sua partecipazione in diversi contesti di segnalazione e nella mitosi.
• MEK1 è ampiamente espresso con un'abbondanza molto bassa nel cervello, coerente con il suo ruolo ubiquitario nella regolazione di processi cellulari fondamentali.
• Modifiche post-traduzionali come la fosforilazione (es. su Thr292) e l'acetilazione modulano finemente l'attività di MEK1, e mutazioni sono associate a cardiomiopatia, displasia ectodermica e disabilità intellettiva.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente ai residui intorno a Thr292 di MEK1 umano (UniProt Q02750). Per il Western blot, considerare di includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi cellulare per mantenere i segnali dipendenti dalla fosforilazione.
• In ELISA, il rivestimento dell'antigene con il peptide fosforilato potrebbe richiedere l'ottimizzazione del buffer di rivestimento e delle condizioni di blocco per garantire la specificità fosfo-dipendente.
• Data l'elevata conservazione di MEK1 tra uomo, topo e ratto, si prevede che questo anticorpo rilevi la forma fosforilata in tutte e tre le specie; tuttavia, la reattività crociata dovrebbe essere confermata sperimentalmente nelle specie, tessuti/tipi cellulari rilevanti.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è di circa 43 kDa. Validare la dimensione della banda utilizzando appropriati controlli del sito fosforilato (es. trattamento con lambda fosfatasi) per confermare la specificità.
• Essendo un anticorpo fosfo-specifico, la consistenza lotto per lotto è critica per applicazioni quantitative come l'ELISA. Raccomandiamo titolazione e test paralleli con controlli di peptide non fosforilato per minimizzare la variabilità.

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