Anticorpo policlonale coniglio Phospho-MEK1-T292 per WB e ELISA - Q02750

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MEK1

• MEK1 (MAP2K1), conosciuta anche come PRKMK1, MKK1, è una chinasi della mitogen-activated protein kinase a doppia specificità di 43 kDa che costituisce una chinasi essenziale nella cascata di trasduzione del segnale RAS-RAF-MEK-ERK.
• Dopo l'attivazione da parte di RAF1, MEK1 fosforila sia un residuo di treonina che uno di tirosina all'interno del motivo Thr-Glu-Tyr di ERK1 (MAPK3) e ERK2 (MAPK1), portando alla loro attivazione e a eventi di segnalazione a valle che regolano la crescita cellulare, l'adesione, la sopravvivenza, la differenziazione, la trascrizione, il metabolismo e i riarrangiamenti del citoscheletro.
• In modo dipendente da KSR1 o KSR2, MEK1 attiva anche BRAF liberando le interazioni inibitorie intramolecolari e promuovendo la dimerizzazione di BRAF. Riferimenti correlati: PMID:29433126
• MEK1 è coinvolta nell'esportazione nucleare del recettore gamma attivato dal proliferatore di perossisomi (PPARG) e partecipa alla regolazione della dinamica endosomiale, inclusa la lavorazione dei lisosomi, il ciclo degli endosomi attraverso il compartimento di riciclo perinucleare (PNRC) e la frammentazione dell'apparato del Golgi durante la mitosi.
• La proteina si localizza in numerosi compartimenti subcellulari, tra cui citoplasma, citoscheletro (centrosoma e corpo del fuso mitotico), nucleo e membrana, in linea con i suoi diversi ruoli funzionali.
• MEK1 è ampiamente espressa in tutti i tessuti, con livelli estremamente bassi rilevati nel cervello.
• Modifiche post-traduzionali come la fosforilazione sulla treonina 292 (e altri siti), l'acetilazione e lo splicing alternativo regolano la sua attività e le sue interazioni. Le mutazioni in MAP2K1 sono associate a patologie come cardiomiopatia, displasia ectodermica e disabilità intellettiva (disturbi dello spettro della sindrome Noonan).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico intorno alla posizione T292 della MEK1 umana; questo anticorpo è progettato per riconoscere specificamente la forma fosforilata. Trattare le cellule con stimoli appropriati (ad es. fattori di crescita) e includere inibitori di fosfatasi nei buffer di lisì per preservare lo stato di fosforilazione.
• Per Western blot è attesa una banda intorno ai 43 kDa. Utilizzare un gel SDS-PAGE riducente e convalidare la rilevazione con controlli positivi e negativi (ad es. lisati trattati con fosfatasi o blocco con non fosfopeptide).
• L'anticorpo ha dimostrato di funzionare nelle applicazioni WB e ELISA. Rileva la MEK1 sia umana che di ratto. Si consiglia di ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per i tuoi specifici campioni e sistema di rilevazione.
• Quando si valutano le dinamiche di fosforilazione di MEK1, esperimenti a corso di tempo e inibitori della via di segnalazione (ad es. inibitori di MEK) possono aiutare a confermare la specificità.

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