mAb coniglio anti Phospho-MEK1/MEK2-S217/S221 per WB, IP, ELISA - Q02750/P36507

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MEK1/MEK2

• Le proteine chinasi a doppia specificità MEK1 (MAP2K1) e MEK2 (MAP2K2) sono componenti essenziali della cascata di segnalazione MAPK/ERK, che trasmettono i segnali da RAS-RAF attivato a ERK1/2.
• Dopo l'attivazione, MEK1/2 catalizzano la fosforilazione concomitante di un residuo di treonina e tirosina nel motivo Thr-Glu-Tyr di ERK1 (MAPK3) e ERK2 (MAPK1), portando alla loro attivazione.
• MEK1/2 sono attivati dalle chinasi RAF (es. RAF1) a valle della stimolazione di recettori di fattori di crescita, citochine e ormoni, collegando i segnali extracellulari alle risposte intracellulari.
• MEK1 promuove anche l'attivazione di BRAF legandosi alle proteine scaffold KSR1 o KSR2, interrompendo un'interazione inibitoria e facilitando la dimerizzazione di BRAF. Riferimenti correlati: PMID:29433126
• La via MAPK/ERK regola diversi processi biologici tra cui crescita cellulare, adesione, sopravvivenza e differenziazione, oltre che trascrizione, metabolismo e riarrangiamenti citoscheletrici.
• MEK1 si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro (centrosoma, polo del fuso mitotico), nel nucleo e nella membrana; MEK2 mostra una distribuzione simile.
• MEK1 è ampiamente espresso, con livelli estremamente bassi nel cervello. MEK2 ha un profilo di espressione ampio simile.
• MEK1/2 sono fosfoproteine e serine/threonine/tyrosine chinasi; la fosforilazione di MEK1 alle posizioni Ser217 e Ser221 è un evento chiave per l'attivazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico mirato alle Serine 217 e 221 fosforilate; ci si aspetta che l'anticorpo riconosca specificamente la forma attiva doppiamente fosforilata di MEK1/2.
• Per il western blotting, MEK1/2 appaiono come bande intorno a 40–44 kDa. Utilizzare controlli positivi appropriati (es. lisati cellulari stimolati con EGF) e includere inibitori di fosfatasi durante la preparazione del campione.
• Per l'immunoprecipitazione, un anticorpo monoclonale di coniglio offre alta specificità e compatibilità con i protocolli IP standard. Validare l'efficienza di pull-down con letture di phospho-ERK1/2.
• Questo anticorpo è adatto per ELISA; considerare il rivestimento con il fosfopeptide o l'utilizzo di un formato sandwich per rilevare MEK1/2 fosforilati nei lisati cellulari.

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