pAb coniglio Phospho-MLKL-S358 - Q8NB16

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di MLKL

• MLKL (proteina simile al dominio chinasi di linea mista) è una pseudochinasi priva di attività chinasi intrinseca e agisce come esecutore chiave nella via della necroptosi. Riferimenti correlati: PMID:22265413 PMID:22265414 PMID:22421439
• Dopo la fosforilazione da parte di RIPK3 in S358, MLKL forma omotrimeri, si trasloca sulla membrana plasmatica e induce la morte cellulare necrotica tramite influsso di calcio e rottura della membrana. Riferimenti correlati: PMID:22265413 PMID:22265414 PMID:22421439
• In risposta all'infezione da ortomixovirus, RIPK3 nucleare fosforila MLKL, causando la rottura dell'involucro nucleare e la fuoriuscita di DNA cellulare nel citosol (per similarità).
• MLKL lega l'inositolo esachisfosfato (InsP6), che è essenziale per la sua funzione necroptotica. Riferimenti correlati: PMID:29883610
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, membrana cellulare e nucleo, in linea con la traslocazione dinamica che avviene durante la necroptosi.
• MLKL è una fosfoproteina; sono stati descritti splicing alternativo, domini coiled-coil e domini di legame nucleotidico.
• Il peso molecolare previsto della MLKL umana è di circa 54 kDa (UniProt: 54479 Da).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per Western blot, utilizzare inibitori di fosfatasi durante la preparazione dei campioni per preservare l'epitopo fosforilato S358.
• Includere un controllo non fosforilato o un trattamento con fosfatasi per confermare la fosfospecificità.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con la MLKL di ratto; se si utilizzano campioni di ratto, eseguire la convalida nel sistema cellulare o tissutale appropriato.
• In ELISA, l'immunogeno peptidico fosforilato sintetico può essere utilizzato come controllo positivo per lo sviluppo del saggio.
• In Western blot è attesa una banda di circa 54 kDa per la MLKL umana.

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