pAb di coniglio Phospho-MLKL-S441 per WB e ELISA - Q9D2Y4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MLKL

• Funzione di pseudochinasi e attivazione nella necroptosi: MLKL è una pseudochinasi priva di attività chinasica intrinseca e rappresenta un effettore critico della necroptosi indotta da TNF. Dopo la fosforilazione da parte di RIPK3, forma omotrimeri, si localizza sulla membrana plasmatica e induce morte cellulare necrotica tramite influsso di calcio e danno alla membrana. Riferimenti correlati: PMID:23835476 PMID:24012422 PMID:24019532
• Via di necroptosi nucleare: MLKL medisce anche la necroptosi nucleare in risposta all'infezione virale: la fosforilazione di RIPK3 nucleare danneggia l'involucro nucleare, rilasciando DNA nel citosol. Riferimenti correlati: PMID:32200799 PMID:32296175
• Legame con inositolo fosfato: Il legame con inositolo fosfati altamente fosforilati (es. InsP6) è essenziale per la funzione necroptotica di MLKL.
• Localizzazione subcellulare: MLKL si localizza nel citoplasma, sulla membrana cellulare e nel nucleo.
• Modello di espressione tissutale: Altamente espresso nel timo, colon, intestino, fegato, milza e polmone; bassa espressione nel cuore, muscolo scheletrico e rene; non rilevato nel cervello.
• Splicing alternativo: Il gene Mlkl subisce splicing alternativo, generando molteplici isoforme.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per Western blot, indurre la necroptosi in lisati di cellule o tessuti (es. TNF + inibitore della caspasi) per arricchire MLKL fosforilato; includere inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione e confermare la banda a ~54 kDa.
• Per ELISA, utilizzare il peptide fosforilato come antigene di coating e convalidare la specificità con la controparte non fosforilata; la reattività crociata contro uomo e ratto deve essere verificata nei sistemi di campione corrispondenti.
• Considerare protocolli di convalida specifici per fosfati come il trattamento con fosfatasi per confermare la specificità del segnale.

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