Phospho-Na+/K+-ATPase-S16 Anticorpo Policlonale di Coniglio per WB - P05023

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATP1A1 (Subunità alfa-1 della Na+/K+-ATPasi)

• Catalizza il trasporto attivo di Na+ fuori dalla cellula e K+ all'interno, stabilendo gradienti elettrochimici critici per il potenziale di membrana, l'assorbimento dei nutrienti e il controllo del volume cellulare. Riferimenti correlati: PMID:29499166, PMID:30388404, PMID:35803952
• Sottoposto a transizioni conformazionali E1/E2 alimentate dall'idrolisi dell'ATP, alternando il legame e il rilascio degli ioni per trasportare 3 Na+ fuori / 2 K+ dentro per ciclo. Riferimenti correlati: PMID:35803952
• Membro della famiglia delle ATPasi di tipo P con dieci domini transmembrana e siti intracellulari di legame per l'ATP e fosforilazione; la subunità alfa-1 è l'isoforma più ubiquitariamente espressa.
• Localizzata principalmente alla membrana basolaterale negli epiteli, al sarcolemma del muscolo, alle proiezioni assonali e ai melanosomi, in linea con i suoi ruoli nel trasporto transepiteliale e nell'eccitabilità.
• La fosforilazione a Ser16 (rilevata da questo anticorpo) è una modifica regolatoria; la proteina è anche acetilata e subisce splicing alternativo che ne influenza la funzione.
• Le mutazioni in ATP1A1 sono associate alla malattia di Charcot-Marie-Tooth tipo 2DD, ipomagnesemia, epilessia e disabilità intellettiva, sottolineando la sua importanza nel sistema nervoso.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Generato contro un peptide fosforilato intorno a Ser16, si prevede che questo anticorpo riconosca la proteina endogena solo quando fosforilata in questo sito. Convalidare la specificità confrontando i segnali da campioni trattati con fosfatasi e non trattati.
• Per il Western blot, preparare i lisati con inibitori delle fosfatasi e considerare l'uso di un peptide bloccante non fosforilato per confermare l'identità della banda.
• In ELISA, utilizzare il peptide fosforilato immunogeno e una controparte non fosforilata per valutare la reattività crociata.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con umano, topo e ratto; titrare per ciascuna specie poiché i livelli di espressione possono differire.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi una variazione da lotto a lotto; rivalidare nel proprio saggio quando si riceve un nuovo lotto.

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