Anticorpo policlonale di coniglio Phospho-NF-kB p65/RelA-S529 per WB, ELISA - Q04206

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Fattore di Trascrizione p65

• NF-kB p65 (RELA) è una subunità del complesso del fattore di trascrizione NF-kappa-B, che forma omo- o eterodimeri con altre proteine Rel come NFKB1/p50, RELB, REL e NFKB2/p52.
• L'eterodimero RELA-NFKB1 è il complesso più abbondante, che si lega ai siti del DNA kappa-B per regolare la trascrizione di geni coinvolti in infiammazione, immunità, crescita cellulare, apoptosi e altri processi.
• RELA è prevalentemente citoplasmatico in uno stato inattivo legato agli inibitori I-kappa-B; in seguito a stimolazione, la fosforilazione mediata da IKK e la degradazione di I-kappa-B rilasciano RELA per la traslocazione nucleare.
• RELA è essenziale per l'espressione genica delle citochine nelle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:15790681
• RELA è un fattore di trascrizione chiave che regola la risposta all'interferone durante l'infezione da SARS-CoV-2. Riferimenti correlati: PMID:33440148
• RELA subisce varie modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione, metilazione, ubiquitinazione e S-nitrosilazione, che ne modulano l'attività; la fosforilazione a Ser529 (il sito dell'immunogeno) è uno di questi eventi regolatori.
• La localizzazione subcellulare è principalmente nucleare dopo l'attivazione, ma RELA si sposta anche tra nucleo e citoplasma.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno a Ser529 di RELA umano, rendendo questo anticorpo specifico per la forma fosforilata. Utilizzare inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare i segnali fosfo.
• Per il Western blotting, validare l'anticorpo in linee cellulari o tessuti rilevanti stimolati per indurre l'attivazione di NF-kB, e includere controlli appropriati (ad es. campioni non stimolati o trattati con fosfatasi) per confermare la specificità fosfo.
• L'anticorpo reagisce in modo incrociato con RELA umano, di topo e di ratto, quindi può essere utilizzato per queste specie; tuttavia, verificare la specificità nel sistema del campione target.
• Nelle applicazioni ELISA, si consiglia l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e dell'intervallo di rilevamento per risultati coerenti.

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