Anticorpo Policlonale di Coniglio Fosfo-NF-kB p65/RelA-T505 - Q04206

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA è una subunità del complesso del fattore di trascrizione NF-kB, un regolatore pleiotropico attivato da stimoli diversi per controllare geni coinvolti in infiammazione, immunità, crescita cellulare, differenziazione, tumorigenesi e apoptosi.
• Il complesso NF-kB attivo può essere un omo- o eterodimero di proteine della famiglia Rel; l'eterodimero RELA-p50 è la forma più abbondante, che si lega ai siti k-B nel DNA bersaglio e agisce come attivatore trascrizionale.
• Altri membri della famiglia Rel includono RELB, NFKB1 (p105/p50), NFKB2 (p52) e c-REL, con diverse combinazioni di dimeri che forniscono specificità e diversità funzionale.
• Nelle cellule a riposo, NF-kB è trattenuto nel citoplasma attraverso l'interazione con le proteine inibitrici I-kB; in seguito a stimolazione, la fosforilazione e degradazione di I-kB libera NF-kB per la traslocazione nucleare.
• RELA è essenziale per l'espressione genica delle citochine nelle cellule T, una funzione chiave nell'immunità adattativa. Riferimenti correlati: PMID:15790681
• Durante l'infezione da SARS-CoV-2, RELA funge da fattore di trascrizione critico che regola la risposta all'interferone. Riferimenti correlati: PMID:33440148
• La proteina subisce ampie modifiche post-traduzionali (es. fosforilazione, acetilazione, metilazione, ubiquitinazione) che modulano la sua attività, stabilità e interazioni.
• La localizzazione subcellulare cicla tra nucleo e citoplasma, con la fosforilazione in vari siti (incluso Thr505) che influenza l'attività trascrizionale o la dinamica del complesso.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato che copre Thr505, quindi la reattività dell'anticorpo è dipendente dalla fosforilazione. Assicurarsi che i campioni siano preparati con inibitori delle fosfatasi per preservare l'epitopo fosforilato.
• Per il western blot, utilizzare protocolli standard SDS-PAGE e di trasferimento; la dimensione attesa della banda per RELA fosforilato è ~60 kDa. Ottimizzare le condizioni di blocco e diluizione dell'anticorpo empiricamente.
• In ELISA, può essere utilizzato il rivestimento della piastra con peptide fosforilato o lisato proteico; la reattività crociata con le forme non fosforilate dovrebbe essere valutata nel sistema sperimentale.
• Questo anticorpo è reattivo con campioni umani; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza attorno a Thr505 prima dell'uso.

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