Anticorpo monoclonale coniugato al fosfato di Phospho-NF-κB2-S866 per WB, ELISA - Q00653

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NF-κB2 (p100/p52)

• NF-κB2 codifica per la subunità p100, che viene processata proteoliticamente per generare la subunità p52 che lega il DNA. p100 è la forma principale, mentre p52 è la forma minore, prodotta tramite l'attivazione non canonica di NF-κB.
• Il complesso NF-κB è un fattore di trascrizione omodimerico o eterodimerico che regola l'infiammazione, l'immunità, la crescita cellulare e l'apoptosi. p52 forma eterodimeri con RelB per attivare la trascrizione o omodimeri per reprimerla.
• Nella via non canonica, la fosforilazione di p100 a S866 (e in altri residui) innesca il processo dipendente dall'ubiquitina che porta alla formazione di p52, consentendo la traslocazione nucleare e l'attivazione dei geni bersaglio.
• NF-κB2 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo; p100 trattiene principalmente le proteine NF-κB associate nel citoplasma, mentre i dimeri di p52 si spostano nel nucleo dopo la stimolazione.
• p52 lega la sequenza consenso del DNA κB 5'-GGRNNYYCC-3' negli enhancer dei geni della risposta immunitaria e della fase acuta.
• In sinergia con RELB, NF-κB2 regola l'orologio circadiano reprimente l'attività del fattore di trascrizione attivatore dell'eterodimero CLOCK-BMAL1.
• La proteina è una fosfoproteina con molteplici modifiche; le mutazioni in NFKB2 sono associate all'immunodeficienza variabile comune (CVID10).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un fosfopeptide sintetico corrispondente alla posizione S866 del p100 umano, quindi riconosce NF-κB2 solo quando è fosforilato in questo residuo.
• Per il western blotting, verificare la rilevazione di una banda di ~97 kDa (p100) e eventualmente di una banda di ~52 kDa (p52) nei lisati di cellule stimolate per attivare la via NF-κB non canonica (ad esempio con linfotossina β o anticorpi anti-LTβR).
• Poiché l'anticorpo presenta reazione crociata con NF-κB2 di topo, può essere adatto per studi su modelli murini; è comunque necessaria la validazione nel tipo di tessuto o cellulare specifico.
• Per l'ELISA, valutare l'utilizzo dell'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione con controlli appropriati per garantire la specificità per la forma fosforilata.

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