pAb di coniglio Phospho-NF2-S518 - P35240

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NF2

• Il gene NF2 codifica per Merlin (proteina simile a Moesina-ezrina-radixina), anche nota come Schwannomina, un membro della famiglia delle proteine ERM (ezrina/radixina/moesina) che collega il citoscheletro di actina alle proteine di membrana.
• Merlin agisce come oncosoppressore regolando la via di segnalazione Hippo/SWH; promuove la fosforilazione delle chinasi LATS1/2 per limitare la proliferazione cellulare e indurre l'apoptosi.
• Potrebbe stabilizzare la membrana cellulare e inibire la segnalazione della PI3 chinasi legandosi ad AGAP2 e neutralizzando la sua attività stimolatoria.
• Merlin sopprime la tumorigenesi inibendo il complesso E3 ubiquitina-proteina ligasi CUL4A-RBX1-DDB1-VprBP/DCAF1, prevenendo la degradazione dei fattori pro-apoptotici.
• Subcellularmente, Merlin si localizza sulla membrana plasmatica in corrispondenza di filopodi e ruffles, oltre che nel citoplasma, nella regione perinucleare, nei granuli citoplasmatici, nel nucleo e nel citoscheletro, riflettendo il suo ruolo dinamico nell'inibizione da contatto.
• La proteina è ampiamente espressa; esistono molteplici isoforme, con le isoforme 1 e 3 che sono predominanti, mentre le altre seguono pattern specifici per tessuto (ad es. retina, tessuti fetali).
• La principale modificazione post-traduzionale è la fosforilazione alla Serina 518, che modula la sua conformazione e l'attività oncosoppressiva, come indicato dalla parola chiave UniProt "fosfoproteina".
• Merlin è associato alla neurofibromatosi di tipo 2 (NF2): le mutazioni in questo gene causano sordità; è elencato come membro del proteoma di riferimento e come oncosoppressore.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un peptide fosforilato in corrispondenza della serina 518; pertanto è previsto che riconosca specificamente la forma fosforilata di NF2/Merlin. Aggiungere inibitori della fosfatasi nei buffer di lisì per preservare lo stato di fosforilazione.
• Per western blotting, si osserverà una banda a circa 70 kDa. Per confermare la fosfo-specificità, si consiglia di trattare i campioni con lambda fosfatasi o utilizzare un controllo di competizione con peptide non fosforilato.
• Nell'immunistochimica (IHC-P), convalidare l'anticorpo su sezioni di tessuto note per esprimere Merlin fosforilato, come lo schwannoma umano o i tessuti cerebrali normali, e includere un controllo di isotipo.
• Le applicazioni ELISA possono essere eseguite utilizzando il peptide fosforilato come antigene di rivestimento; un peptide non fosforilato può servire come controllo negativo.
• La reattività incrociata con topo e ratto è riportata; tuttavia, a causa della conservazione della sequenza, verificare le prestazioni nel sistema di campioni pertinente per ogni specie.

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