Anticorpo Policlonale di Coniglio Phospho-NFKB1-S907 per Western Blot - P19838

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NFKB1

• NFKB1 codifica la proteina precursore p105, che viene processata proteoliticamente per produrre la subunità attiva p50 del complesso del fattore di trascrizione NF-kappa-B. Riferimenti correlati: PMID:1423592
• La subunità p50, insieme a RELA/p65, forma il complesso eterodimerico p65-p50, un attivatore trascrizionale che si lega alla sequenza consenso kappa-B nei promotori dei geni bersaglio, regolando le risposte immunitarie e infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:1740106 PMID:7830764
• NFKB1/p105 funge anche da inibitore citoplasmatico, trattenendo i dimeri NF-kappa-B in uno stato inattivo finché segnali di attivazione non ne innescano la degradazione tramite la via della chinasi I-kappa-B.
• La proteina subisce ampie modificazioni post-traduzionali, inclusa la fosforilazione in Ser907, che influenza il suo processamento e l'attività trascrizionale.
• Nelle cellule a riposo, NFKB1/p105 è prevalentemente citoplasmatica, ma dopo stimolazione, i complessi contenenti p50 si traslocano nel nucleo per regolare l'espressione genica.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme; il precursore p105 a lunghezza intera ha un peso molecolare di circa 105 kDa, mentre la subunità matura p50 è di circa 50 kDa.
• La segnalazione di NF-kappa-B è centrale per la sopravvivenza cellulare, la proliferazione, la differenziazione e l'apoptosi, collegando NFKB1 al cancro, alle malattie infiammatorie croniche e ai disturbi immunitari.
• NFKB1/p105 interagisce anche con MAP3K8 per reprimere la segnalazione MAPK, evidenziando il suo ruolo nell'interazione tra le vie infiammatorie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il rilevamento in Western Blot di phospho-NFKB1 (Ser907), includere inibitori delle fosfatasi durante la lisi cellulare e la preparazione del campione per preservare la fosforilazione.
• Utilizzare linee cellulari immunitarie o infiammatorie stimolate (es. cellule HeLa o Jurkat trattate con TNF-alfa) come controlli positivi per confermare la specificità dell'anticorpo.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario (es. 1:500-1:2000) e le condizioni di incubazione in base all'intensità del segnale e ai livelli di fondo nel proprio sistema.
• Utilizzarlo in coppia con un anticorpo pan-NFKB1 per verificare i livelli totali di proteina e confermare le variazioni specifiche della fosforilazione.
• Se si utilizza per immunoisochimica o altre applicazioni, validare l'anticorpo nel sistema di campionamento rilevante poiché il reagente è stato testato solo per il Western Blot.

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