Anticorpo Policlonale di Coniglio anti-Fosfo-p38 MAPK-T180 per WB, IHC-P, ELISA - Q16539

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di p38 MAPK

• MAPK14 codifica per la chinasi p38 alfa attivata da mitogeni (MAPK), una serina/treonina chinasi essenziale per le risposte cellulari allo stress, alle citochine pro-infiammatorie e ai mitogeni.
• È uno dei quattro membri della famiglia p38 MAPK (alfa, beta, gamma, delta) ed è nota con numerosi alias tra cui CSBP, SAPK2A e MXI2.
• Dopo l'attivazione tramite doppia fosforilazione a livello di Thr-180 e Tyr-182, p38 alfa fosforila un'ampia gamma di substrati, incluse le chinasi a valle MAPKAPK2/MK2, RPS6KA5/MSK1 e MKNK1/MNK1, regolando così l'espressione genica, la stabilità dell'mRNA e la sintesi proteica. Riferimenti correlati: PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• Nel nucleo, p38 MAPK attivata fosforila direttamente o indirettamente fattori di trascrizione come ATF1, ATF2, ELK1, p53/TP53 e MEF2C, modulando l'espressione di geni a risposta immediata e i programmi trascrizionali indotti dallo stress. Riferimenti correlati: PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• p38 MAPK svolge anche un ruolo citoplasmatico nella regolazione del turnover proteico, dell'endocitosi e dell'autofagia; ad esempio, fosforila SIAH2 e modula il traffico di ATG9. Riferimenti correlati: PMID:17003045, PMID:19893488
• Lo splicing alternativo produce le isoforme MXI2 (attivata da mitogeni/stress ossidativo; debole attività chinasica verso ELK1 e ATF2) ed EXIP (pro-apoptotica).
• La frazionamento subcellulare rivela la presenza di p38 MAPK sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con i suoi duplici ruoli di segnalazione e trascrizionale.
• p38 MAPK è espressa nella maggior parte dei tessuti, con i livelli più alti nel cervello, cuore, placenta, pancreas e muscolo scheletrico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Poiché l'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno al Thr-180 di MAPK14 umana, si prevede che questo anticorpo riconosca specificamente la forma fosforilata e attiva di p38 MAPK. Per una rilevazione ottimale, assicurarsi che i campioni siano preparati in condizioni che preservino la fosforilazione proteica (ad es., utilizzare inibitori delle fosfatasi ed evitare incubazioni prolungate a temperatura ambiente).
• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di un metodo di arricchimento per proteine a bassa abbondanza se la fosforilazione endogena di p38 è debole; il peso molecolare previsto è di circa 41 kDa.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo dovrebbero essere determinati empiricamente; un segnale fosfo-specifico può essere validato pre-trattando le sezioni tissutali con fosfatasi lambda.
• Per le applicazioni ELISA, utilizzare dove possibile uno standard ricombinante di p38 fosforilata e confermare la linearità e la specificità utilizzando controlli con peptide non fosforilato.
• È stata osservata reattività crociata con campioni umani, di topo e di ratto, ma si raccomanda la validazione nel proprio sistema sperimentale specifico.

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