Anticorpo policlonale rabbit Phospho-p38 MAPK-T180/Y182 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q15759/P53778/O15264/Q16539

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della p38 MAPK

• MAPK11 è una serina/treonina chinasi e un membro della famiglia delle protein chinasi attivate da mitogeni p38, nota anche come SAPK2b o p38-2.
• Come parte della via di trasduzione del segnale delle MAP chinasi, risponde a stimoli extracellulari come citochine proinfiammatorie e stress fisico, portando all'attivazione diretta dei fattori di trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:12452429, PMID:20626350, PMID:35857590
• Le p38 MAPK fosforilano un'ampia gamma di target a valle, tra cui le chinasi MSK1/2, MK2/3 e MNK1/2, che a loro volta regolano la trascrizione, la stabilità dell'mRNA e la traduzione. Riferimenti correlati: PMID:9687510, PMID:11154262
• Nel nucleo, le p38 MAPK fosforilano fattori di trascrizione come ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, PTPRH, DDIT3, p53, MEF2C e MEF2A per modulare l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:10330143, PMID:15356147, PMID:9430721
• La chinasi regola anche il rimodellamento della cromatina indurre la fosforilazione dell'istone H3 in corrispondenza di 'Ser-10', aumentando il reclutamento di NF-kappa-B ai promotori dei geni infiammatori.
• Subcellularmente, MAPK11 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo.
• L'espressione tissutale è più elevata nel cervello e nel cuore, con presenza aggiuntiva nella placenta, polmone, fegato, muscolo scheletrico, rene e pancreas.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono la fosforilazione in T180 e Y182 (fondamentale per l'attivazione) e la proteina è classificata con parole chiave risposta allo stress e regolazione della trascrizione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico, l'anticorpo riconosce specificamente la forma dual-fosforilata attivata della p38 MAPK. Verificare la specificità confrontando lisati cellulari trattati e non trattati (ad esempio con e senza induttori di stress).
• Per il Western blotting, si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE al 10% e caricare 20–30 μg di lisato proteico. Si possono osservare più bande dovute alla rilevazione di diverse isoforme di p38 (pesi previsti: 29, 34, 35 e 41 kDa). Includere marcatori di peso molecolare appropriati e un controllo di caricamento.
• Nelle applicazioni di immunoprecipitazione o ELISA, confermare il legame fosfo-specifico in condizioni non denaturanti per garantire l'accessibilità dell'epitopo.
• Per l'immunofluorescenza (IF-P), utilizzare un metodo di fissazione che preservi lo stato di fosforilazione (ad es. paraformaldeide al 4%) e permeabilizzare con 0,1% di Triton X-100.
• Per l'immunistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene con tampone citrato (pH 6,0). Titolare l'anticorpo per trovare la diluizione ottimale.
• Includere sempre un controllo negativo pre-adsorbendo l'anticorpo con il peptide fosforilato, oppure utilizzando un trattamento con fosfatasi alcalina per confermare la fosfo-specificità.

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