mAb coniglio Anti-Fosfo-p53-S33 per WB, ELISA - P04637

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di p53

• Codificato dal gene TP53, l'antigene tumorale cellulare p53 è una fosfoproteina che esiste in diverse isoforme dovute all'alternativo splicing e all'uso di promatori diversi.
• Agisce come fattore di trascrizione multifunzionale che induce l'arresto del ciclo cellulare, la riparazione del DNA o l'apoptosi in seguito a danno del DNA. Riferimenti correlati: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Agisce come un soppressore tumorale cruciale regolando negativamente la divisione cellulare tramite il controllo dell'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Promuove l'apoptosi tramite la stimolazione dell'espressione dell'antigene BAX e FAS o la repressione di Bcl-2; la sua attività è modulata dall'interazione con le proteine ASPP. Riferimenti correlati: PMID:12524540, PMID:17189187
• Si localizza in numerosi compartimenti subcellulari, tra cui nucleo, citoplasma, mitocondri, centrosoma e reticolo endoplasmatico, in linea con i suoi molteplici ruoli regolatori.
• È soggetto a estese modifiche post-traduzionali, tra cui la fosforilazione su serine come S33, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua stabilità e attività trascrizionale.
• È espresso ubiquitariamente con una distribuzione di isoforme dipendente dal tessuto; alcune isoforme possono esercitare effetti dominanti negativi sulle funzioni canoniche di p53.
• Regola l'orologio circadiano reprimendo l'attivazione trascrizionale di PER2 mediata da CLOCK-BMAL1. Riferimenti correlati: PMID:24051492

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Poiché questo anticorpo riconosce la fosforilazione su S33, aggiungi inibitori di fosfatasi ai tamponi di lisit e manipola i campioni su ghiaccio per preservare lo stato di fosforilazione.
• Per Western blot, si consiglia di utilizzare un protocollo di bloccaggio specifico per fosfoproteine e confermare la specificità confrontando i segnali prima e dopo il trattamento con fosfatasi o la competizione peptidica.
• In ELISA, l'anticorpo può essere usato per catturare o rilevare fosfo-p53 in lisati cellulari; includi controlli non fosforilati e non trattati per convalidare la specificità per la forma fosforilata.
• In condizioni normali, p53 può essere poco abbondante; l'arricchimento tramite immunoprecipitazione o il trattamento con agenti dannosi per il DNA può migliorare la rilevazione.

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