pAb coniglio Phospho-p53-S6 - P04637

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della p53

• L'antigene tumorale cellulare p53 è un fattore di trascrizione multifunzionale e un soppressore tumorale che induce l'arresto del ciclo cellulare, la riparazione del DNA o l'apoptosi in risposta a stress cellulare.
  Riferimenti correlati: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• La p53 regola negativamente la divisione cellulare attivando geni come gli inibitori delle chinasi ciclina-dipendenti e controlla l'apoptosi modulando l'espressione di BAX, FAS e Bcl-2.
  Riferimenti correlati: PMID:12524540, PMID:17189187
• La proteina è codificata dal gene TP53, noto anche con gli alias BCC7, LFS1, BMFS5 e TRP53, e genera più isoforme tramite splicing alternativo e utilizzo di promotori differenti.
• A livello subcellulare, la p53 si sposta tra citoplasma e nucleo e si localizza nel corpo PML, nel reticolo endoplasmatico, nella matrice mitocondriale, nel centrosoma e in altri comparti, riflettendo le sue diverse funzioni.
• La p53 è soggetta a estese modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione, ubiquitinazione e metilazione, che regolano la sua stabilità e attività; la fosforilazione alla serina 6 (S6) è un evento regolatorio importante.
• Come soppressore tumorale, la p53 è coinvolta nella sindrome di Li-Fraumeni e in vari tipi di cancro, e interagisce con proteine virali, evidenziando il suo ruolo nelle interazioni ospite-virus.
• La p53 svolge anche un ruolo nella regolazione del ritmo circadiano reprimendo la trascrizione di PER2 mediata da CLOCK-BMAL1.
  Riferimenti correlati: PMID:24051492
• L'espressione tissutale è ubiquitaria, con isoforme specifiche che mostrano pattern dipendenti dal tessuto; per esempio, l'isoforma 2 è assente nel cervello e nel polmone, mentre l'isoforma 8 è limitata al colon, al midollo osseo e ad alcuni altri tessuti.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per Western blot, validare la specificità utilizzando lisati trattati con fosfatasi o competizione peptidica con peptidi fosforilati e non fosforilati per confermare il riconoscimento della S6 fosforilata.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare di rivestire la piastra con un fosfopeptide corrispondente alla regione S6 per aumentare la sensibilità e la specificità della rilevazione.
• Data l'espressione ubiquitaria della p53, selezionare linee cellulari o campioni tissutali appropriati e includere inibitori di fosfatasi durante la lisi per preservare i segnali di fosforilazione; ottimizzare le quantità di caricamento e le diluizioni dell'anticorpo per ogni sistema sperimentale.
• Trattandosi di un anticorpo policlonale di coniglio, aspettarsi un segnale robusto ma verificare la coerenza tra lotti e la reattività crociata nella matrice del tuo campione.

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