Fosfo-p70 S6 Chinasi 1-T389 Coniglio pAb - P23443

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della chinasi beta-1 della proteina ribosomiale S6

• RPS6KB1 codifica la chinasi beta-1 della proteina ribosomiale S6 da 70 kDa (p70S6K), nota anche come S6K1, chinasi alfa p70 S6 o serina/treonina chinasi proteica 14A (STK14A).
• La chinasi agisce come un effettore a valle chiave di mTORC1, regolando la sintesi proteica e la crescita cellulare. A seguito di stimolazione mitogena, la fosforilazione mediata da mTORC1 dissocia p70S6K dal complesso EIF3, consentendole di fosforilare fattori di traduzione come EIF4B e PDCD4, promuovendo così l'inizio della traduzione dipendente dal cappuccio. Riferimenti correlati: PMID:16286006 PMID:17053147
• p70S6K1 contribuisce alla sopravvivenza cellulare inattivando la proteina pro-apoptotica BAD attraverso la fosforilazione. Inoltre, fosforila l'URI1 mitocondriale, interrompendo il complesso URI1-PPP1CC; il PPP1CC rilasciato defosforila p70S6K1 in Thr-412, creando un ciclo di feedback negativo per la segnalazione anti-apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:17936702
• La chinasi esercita un feedback negativo sulla segnalazione mTORC2/AKT1 fosforilando componenti di mTORC2 (SIN1, MTOR, RICTOR) e controlla anche l'attività di mTORC1 fosforilando DEPTOR. Riferimenti correlati: PMID:15899889 PMID:19720745 PMID:19935711 PMID:22017876
• p70S6K1 media la resistenza all'insulina indotta da TNF fosforilando IRS1 in più residui di serina, mirandolo per la degradazione. Riferimenti correlati: PMID:18952604
• Fosforila e attiva CAD, l'enzima limitante nella sintesi de novo delle pirimidine, accoppiando così la segnalazione mTOR al metabolismo dei nucleotidi. Riferimenti correlati: PMID:23429703
• La proteina si localizza in più compartimenti subcellulari tra cui il citoplasma, il nucleo, la membrana esterna mitocondriale e la sinapsi/sinaptosoma. È ampiamente espressa e soggetta a splicing alternativo e varie modifiche post-traduzionali (es. fosforilazione, acetilazione).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, è prevista una banda corrispondente alla proteina bersaglio a circa 59 kDa. Includere inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi per preservare lo stato di fosforilazione.
• Per confermare la specificità fosfo, considerare di eseguire un saggio di defosforilazione usando lambda fosfatasi o competere con il peptide non fosforilato.
• Per IHC-P, ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e la titolazione dell'anticorpo; si raccomanda l'inclusione di appropriati controlli positivi e negativi.
• Nell'ELISA, rivestire la piastra con il peptide immunogeno fosforilato e validare la linearità del segnale attraverso una serie di diluizioni.

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