Anticorpo policlonale coniglio Phospho-PAK2-S20 per WB e ELISA - Q13177

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PAK2

• PAK2 è una serina/treonina chinasi che agisce come effettore a valle di CDC42 e RAC1; subisce autofosforilazione dopo il legame con le GTPasi per regolare la dinamica del citoscheletro, la motilità cellulare e la proliferazione (PubMed:7744004, PubMed:12853446, PubMed:16617111, PubMed:19273597).
  Riferimenti correlati:
  PMID:7744004 PMID:12853446 PMID:16617111 PMID:19273597
• La PAK2 full-length promuove la sopravvivenza cellulare, mentre la scissione da parte delle caspasi in seguito a danno al DNA produce un frammento pro-apoptotico p34 che si trasloca nel nucleo e attiva la via JNK (PubMed:12853446, PubMed:16617111, PubMed:9171063).
  Riferimenti correlati:
  PMID:12853446 PMID:16617111 PMID:9171063
• La sua attività chinasi fosforila numerosi substrati: istone H4 per l'assemblaggio dei nucleosomi, JUN per la proliferazione indotta da EGF, MAPK4/6 per regolare la migrazione e CASP7 per prevenire l'apoptosi (PubMed:21724829, PubMed:21177766, PubMed:21317288, PubMed:21555521, PubMed:27889207).
  Riferimenti correlati:
  PMID:21724829 PMID:21177766 PMID:21317288 PMID:21555521 PMID:27889207
• Ruoli indipendenti dalla chinasi coinvolgono l'orientamento del fuso mitotico tramite associazione con ARHGEF7 e GIT1 (PubMed:19273597, PubMed:19923322).
  Riferimenti correlati:
  PMID:19273597 PMID:19923322
• È espresso ubiquamente con i livelli più alti nel muscolo scheletrico, ovaio, timo e milza.
• Mostra una distribuzione subcellulare dinamica, e si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella regione perinucleare e sulla membrana.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, aggiungere inibitori di fosfatasi nel buffer di lisci per preservare la fosforilazione. Verificare la specificità trattando i campioni con lambda fosfatasi.
• L'immunogeno è un fosfopeptide intorno alla Ser20; la reattività incrociata con PAK2 non fosforilata può essere minima, ma deve essere convalidata.
• Adatto per rilevare l'attivazione di PAK2 in linee cellulari trattate con fattori di crescita o stimoli apoptotici; si consiglia di includere controlli positivi e negativi.
• È stato riportato che l'anticorpo funziona in ELISA; le condizioni appropriate di rivestimento e bloccaggio devono essere ottimizzate.
• La reattività incrociata con PAK2 di topo e ratto è indicata; l'allineamento di sequenza mostra un'elevata conservazione intorno al sito di fosforilazione, ma si raccomanda una convalida locale.

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