Anticorpo policlonale di coniglio anti-fosfo-paxillina (Y118) per WB ed ELISA - P49023

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: funzione e localizzazione della paxillina

• La paxillina è una proteina scaffold multidominio che si localizza nelle adesioni focali, fungendo da adattatore cruciale per l'adesione cellulare e la segnalazione mediate dalle integrine.
• Contiene molteplici motivi di interazione proteica, inclusi domini LIM e motivi LD, che facilitano il legame con proteine strutturali e di segnalazione come vinculina, FAK e Src.
• La paxillina svolge un ruolo centrale nell'organizzazione del citoscheletro di actina collegando l'interfaccia actina-membrana nelle adesioni focali, regolando così la morfologia e la motilità cellulare.
• Attraverso la sua fosforilazione su specifici residui di tirosina (es. Y31, Y118, Y181), la paxillina funge da sito di docking per proteine contenenti domini SH2, modulando le cascate di segnalazione a valle.
• La proteina è coinvolta nel reclutamento di altre molecole regolatrici nei siti di adesione, come evidenziato dalla sua interazione con TRIM15 nelle adesioni focali.
• A livello subcellulare, la paxillina si trova prevalentemente nelle adesioni focali, ma si associa anche alla corteccia cellulare e ai compartimenti citoplasmatici.
• È soggetta a molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione e fosforilazione, che ne influenzano la stabilità e le interazioni proteiche.
• I domini LIM nella paxillina sono motivi di legame dello zinco, che contribuiscono alle interazioni proteina-proteina e al targeting verso i complessi di adesione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato generato utilizzando un peptide fosforilato sintetico corrispondente alla tirosina 118 della paxillina umana, rendendolo adatto a rilevare i livelli di fosforilazione in questo sito.
• Per il Western blotting, è attesa una banda di circa 65 kDa; convalidare la specificità utilizzando il trattamento con fosfatasi o controlli con mutazioni sito-specifiche.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo del fosfopeptide come controllo positivo e del corrispondente peptide non fosforilato per valutare il legame fosfo-specifico.
• La reattività crociata è riportata per l'uomo; verificare la reattività con altre specie se necessario.
• L'anticorpo è fornito come policlonale di coniglio, pertanto la coerenza tra lotti può variare; considerare di titolare l'anticorpo per ottenere prestazioni ottimali nel proprio saggio.

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