pAb di coniglio Phospho-PDGFR alpha-Y1018 per WB, ELISA - P16234

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del recettore al fattore di crescita piastrinico alpha

• Il recettore al fattore di crescita piastrinico alpha (PDGFRA, noto anche come CD140a o PDGFR-2) è un recettore tirosina chinasico di superficie cellulare appartenente alla famiglia dei PDGFR. Lega i ligandi PDGFA, PDGFB e PDGFC, mediando segnali essenziali per la proliferazione, la sopravvivenza, la migrazione e la differenziazione cellulare.
• PDGFRA svolge un ruolo fondamentale nello sviluppo embrionale, inclusa la formazione dello scheletro normale, la chiusura cefalica e lo sviluppo della mucosa gastrointestinale e delle villi intestinali. È inoltre richiesto per il reclutamento delle cellule mesenchimali.
• Nella guarigione delle ferite e nell'attivazione piastrinica, la segnalazione di PDGFRA promuove la migrazione e la chemiotassi cellulare, e contribuisce all'aggregazione piastrinica indotta dalla trombina e alla secrezione di agonisti granulari.
• Il recettore si localizza sulla membrana cellulare, nonché sulle proiezioni cellulari come le ciglia e sull'apparato di Golgi. La sua distribuzione subcellulare è regolata dal legame con il ligando e dall'attivazione.
• PDGFRA subisce l'autofosforilazione su diversi residui di tirosina, tra cui Y1018, che crea siti di aggancio per molecole di segnalazione a valle come PLCG1, PIK3R1 e PTPN11, portando all'attivazione delle vie MAPK/ERK, PI3K/AKT e STAT.
• L'espressione tissuto-specifica è diffusa: rilevata nel cervello, nei fibroblasti, nella muscolatura liscia, nel cuore e negli embrioni, nonché nei tumori del colon primari e metastatici. È presente anche nelle piastrine a livello proteico.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione, glicosilazione e ubiquitinazione, che regolano l'attività del recettore, il traffico e la degradazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide fosforilato intorno alla tirosina 1018 (Y1018) nel dominio intracellulare della PDGFRA umana. Questo sito è un noto sito di autofosforilazione fondamentale per la segnalazione a valle.
• L'anticorpo è adatto per applicazioni Western Blot (WB) e ELISA, come indicato. Per il WB, si consiglia di utilizzare controlli positivi appropriati (ad esempio lisati di cellule stimolate in cui PDGFRA è fosforilata) e convalidare la specificità della rilevazione della fosforilazione confrontando campioni trattati e non trattati.
• Poiché PDGFRA è un recettore transmembrana, i protocolli di estrazione delle proteine di membrana possono migliorare la rilevazione. Il peso molecolare previsto è di 123 kDa; si consiglia di utilizzare percentuali di gel e condizioni di trasferimento appropriate per proteine ad alto peso molecolare.
• Per l'ELISA, la fosfo-specificità deve essere confermata utilizzando peptide fosforilati e non fosforilati o attraverso esperimenti di trattamento con fosfatasi.
• Si ricorda che la reattività crociata è riportata per l'uomo; la reattività con altre specie deve essere convalidata sperimentalmente se necessario.

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