Phospho-PDHA1-S293 Anticorpo monoclonale di coniglio - P08559

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PDHA1

• PDHA1 (Piruvato deidrogenasi componente E1 subunità alfa, forma somatica, mitocondriale), noto anche come PDHE1-A tipo I, è codificato dal gene PDHA1 nell'uomo. È un enzima metabolico cruciale che, insieme a PDHB, costituisce la subunità E1 eterotetramerica del complesso della piruvato deidrogenasi (PDH).
• Il complesso PDH catalizza la conversione complessiva del piruvato in acetil-CoA e CO2, collegando la glicolisi citoplasmatica al ciclo mitocondriale dell'acido tricarbossilico (TCA). Riferimenti correlati: PMID:19081061 PMID:7782287
• Nello specifico, la subunità E1 catalizza la decarbossilazione del piruvato dipendente dal tiamina pirofosfato (TPP) e l'acetilazione riduttiva dei gruppi lipoili legati covalentemente al componente E2. Riferimenti correlati: PMID:17474719 PMID:19081061 PMID:7782287
• PDHA1 appartiene alla famiglia genica del complesso della piruvato deidrogenasi; mutazioni in questo gene sono associate a malattie mitocondriali primarie e alla sindrome di Leigh.
• A livello subcellulare, PDHA1 si localizza nella matrice mitocondriale, in linea con il suo ruolo nel metabolismo del piruvato.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione (es. su Ser293) e acetilazione, che modulano l'attività enzimatica. Parole chiave: Acetilazione, Fosfoproteina, Tiamina pirofosfato, Magnesio, Legame metallico.
• La proteina è espressa in modo ubiquitario nei tessuti.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente ai residui attorno alla Ser293 di PDHA1 umano, che mira a un epitopo specifico per la fosforilazione. Ciò rende l'anticorpo adatto a rilevare PDHA1 endogenamente fosforilato in condizioni di stimolazione appropriate.
• Per il Western blot, PDHA1 ha un peso molecolare previsto di 43 kDa; considerare l'ottimizzazione del blocco e della diluizione dell'anticorpo primario utilizzando lisati di cellule/tessuti umani, di topo o di ratto.
• Per l'immunoprecipitazione, il formato monoclonale di coniglio può offrire un'elevata specificità; validare l'efficienza di cattura con controlli fosfo-positivi e -negativi.
• Le applicazioni ELISA sono validate; ottimizzare l'antigene di ricoprimento e le condizioni di rilevamento per l'analisi fosfo-quantitativa.
• La reattività incrociata riportata include topo e ratto; verificare l'omologia di sequenza attorno al sito di fosforilazione se si estende l'uso ad altre specie.

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