Phospho-PDK1/PDPK1-S241 Rabbit mAb per WB, ELISA - O15530

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PDK1

• La 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 (PDK1), nota anche come PDPK1, PDPK2 e PRO0461, è una chinasi serina/treonina di 63 kDa codificata dal gene PDPK1.
• Agisce come chinasi master, fosforilando e attivando i membri della famiglia AGC tra cui AKT1-3, RPS6KB1, RPS6KA1-3, PRKACA, PRKCD, PRKCZ, SGK1-3, PAK1, TSSK3 e PKN1/2 (PubMed:10226025, 10480933, 10995762). Riferimenti correlati: PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762
• Mediatore chiave della segnalazione dell'insulina: fosforila AKT per controllare la proliferazione cellulare, la sopravvivenza e l'assorbimento di glucosio/amminoacidi (PubMed:10226025, 12167717, 9094314). Riferimenti correlati: PMID:10226025, PMID:12167717, PMID:9094314
• Regola negativamente la segnalazione TGF-beta modulando le interazioni e la fosforilazione delle proteine SMAD, impedendo la translocazione nucleare di SMAD3/4 (PubMed:17327236). Riferimenti correlati: PMID:17327236
• A livello subcellulare si localizza nel citoplasma, nucleo, membrana cellulare e focal adhesions, coerente con i suoi diversi ruoli di segnalazione.
• Espressa in modo ubiquitario; la forma fosforilata a Tyr-9 è marcatamente aumentata nei tessuti malati di polmone, fegato, colon e mammella.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico attorno a Ser241; verificare la specificità tramite trattamento con fosfatasi o competizione con non-fosfopeptide.
• Per il Western blotting, il PDK1 con fosforilazione a Ser241 migra a ~63 kDa; ottimizzare di conseguenza la percentuale del gel e le condizioni di trasferimento.
• L'ELISA può essere utilizzato per quantificare i livelli di fosfo-PDK1; convalidare con controlli appropriati nel sistema di campione pertinente.
• Considerare l'uso in parallelo di anticorpo PDK1 non-fosforilato per valutare i livelli di proteina totale e normalizzare i segnali di fosforilazione.

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