pAb di coniglio Phospho-PDK1/PDPK1-S241 - O15530

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PDK1 (3-fosfoinositide-dipendente protein chinasi 1)

• PDPK1 (PDK1) codifica per una serina/treonina chinasi espressa in modo ubiquario che agisce da regolatore principale della famiglia delle chinasi AGC, che include PKB/AKT, p70 S6K, p90 RSK e le isoforme di PKC. Riferimenti correlati: PMID:10226025 PMID:10480933 PMID:10995762

• Nella segnalazione insulinica, PDK1 fosforila e attiva AKT1 alla Thr308, propagando segnali a valle che controllano l'assorbimento del glucosio, la sintesi di glicogeno e la sopravvivenza cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10226025 PMID:12167717 PMID:9094314

• PDK1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, sulla membrana cellulare e nelle adesioni focali, permettendo una segnalazione diversificata da più compartimenti cellulari.

• La forma tirosina-fosforilata di PDK1 è essenziale per la dinamica delle adesioni focali ed è sovraregolata nei tessuti malati di polmone, fegato, colon e mammella. Riferimenti correlati: PMID:14585963

• PDK1 modola pathway aggiuntivi: regola negativamente la segnalazione del TGF-beta fosforilando le proteine SMAD e attiva NF-κB tramite fosforilazione di IKKB, influenzando le risposte infiammatorie e immunitarie. Riferimenti correlati: PMID:17327236 PMID:16207722

• PDK1 è fondamentale per la motilità e la chemiotassi delle cellule endoteliali vascolari, partecipando ai processi angiogenici. Riferimenti correlati: PMID:17371830

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Gli anticorpi fosfo-specifici richiedono una gestione accurata del campione: aggiungere inibitori delle fosfatasi ai buffer di lisi ed evitare incubazioni prolungate del campione a temperatura ambiente.
• Per Western blotting, trattare una porzione del campione con lambda fosfatasi per confermare la fosfo-specificità della banda a ~63 kDa.
• In immunofluorescenza (IF/ICC), le condizioni di fissazione e permeabilizzazione possono influenzare l'accessibilità all'epitopo; testare più metodi di fissazione (ad esempio metanolo contro formaldeide) per ottenere un segnale ottimale.
• Data la reattività crociata con topo e ratto, validare l'anticorpo nel modello di specie previsto tramite allineamento della sequenza del sito di fosforilazione e della regione antigenica.
• Per le applicazioni ELISA, l'uso di un competitore di peptide fosforilato può essere utile per garantire la specificità del segnale.

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