Anticorpo policlonale coniglio Phospho-PDK1/PDPK1-S241 per WB, IF/ICC, ELISA - O15530

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di PDK1/PDPK1

• PDK1 (PDPK1) è una serina/treonina chinasemaestra che fosforila e attiva un sottogruppo di chinasi della famiglia AGC, tra cui AKT/PKB, chinasi p70 S6, p90 RSK, PKC, SGK e PAK1, regolando di conseguenza la proliferazione cellulare, la sopravvivenza, il metabolismo e l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762
• Svolge un ruolo centrale nella trasduzione del segnale insulinico fosforilando AKT/PKB, che diffonde i segnali a valle controllando l'assunzione di glucosio, l'assunzione di aminoacidi, l'immagazzinamento, la proliferazione cellulare e la sopravvivenza. Riferimenti correlati: PMID:10226025, PMID:12167717, PMID:9094314
• PDK1 regola negativamente la segnalazione TGF-beta modulando le interazioni e la fosforilazione delle proteine SMAD e prevenendo la traslocazione nucleare di SMAD3 e SMAD4. Riferimenti correlati: PMID:17327236
• Attiva la via NF-kappa-B tramite fosforilazione di IKKB, contribuendo alle risposte infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:16207722
• La forma tirosina-fosforilata di PDK1 è fondamentale per la dinamica delle adesioni focali in risposta all'angiotensina II. Riferimenti correlati: PMID:14585963
• PDK1 è essenziale per la motilità e la chemiotassi delle cellule endoteliali vascolari, svolgendo un ruolo nell'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:17371830
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo, sulla membrana cellulare e nelle adesioni focali, riflettendo i suoi ruoli multifunzionali.
• PDK1 è espresso ubiquitousmente; la forma fosforilata alla Tyr-9 è elevata nei tessuti malati di polmone, fegato, colon e mammella.
• L'splicing alternativo produce un'isoforma cataliticamente inattiva; la proteina subisce acetilazione e coniugazione ubiquitino-simile.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un peptide fosfo-specifico corrispondente ai residui intorno alla Serina 241 di PDK1 umano; rileva la forma fosforilata. Per WB e IF/ICC, utilizzare inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi e fissazione.
• Per WB, è prevista una banda a ~63 kDa. Utilizzare lisati cellulari stimolati vs non stimolati (ad esempio trattati con insulina) come controlli positivi/negativi.
• La reattività crociata con topo e ratto permette studi in queste specie; convalidare la specificità dell'anticorpo con controlli appropriati.
• Per ELISA, considerare l'utilizzo di un peptide fosforilato come standard e un peptide non fosforilato per confermare la fosfo-specificità.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per ogni applicazione; gli intervalli di partenza suggeriti possono essere determinati sperimentalmente.

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