Fosfo-PKA C-alfa (PRKACA)-T197 Coniglio pAb - P17612

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PKA C-alfa

• La subunità catalitica alfa della proteina chinasi cAMP-dipendente (PRKACA) è una serina/treonina chinasi che fosforila numerosi substrati in risposta al cAMP, regolando processi cellulari chiave come metabolismo, trascrizione e ciclo cellulare (PubMed:15642694, PubMed:15905176, PubMed:16387847). Riferimenti correlati: PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847
• PRKACA si localizza in numerosi compartimenti subcellulari, tra cui citoplasma, nucleo, membrana cellulare, mitocondrio e ciglia, consentendo una segnalazione spazialmente ristretta.
• Esistono due isoforme: l'isoforma 1 è espressa ubiquitariamente, mentre l'isoforma 2 è specifica dello sperma ed è arricchita negli spermatociti pachitene, riflettendo funzioni tissutali distinte.
• La chinasi è regolata dalla dissociazione cAMP-mediata dalle subunità regolatorie e dalla fosforilazione; è una fosfoproteina con multipli siti di modifica.
• PRKACA agisce come un inibitore chiave della via di segnalazione di smoothened fosforilando i fattori di trascrizione GLI, prevenendone l'attivazione trascrizionale in assenza di ligandi hedgehog (PubMed:16705181). Riferimenti correlati: PMID:16705181
• Le mutazioni in PRKACA sono associate alla sindrome di Cushing, illustrando il suo ruolo critico nella regolazione endocrina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato che comprende la regione T197; trattandosi di un anticorpo fosfo-specifico, si consiglia di validarne la specificità utilizzando lisati trattati con fosfatasi insieme a controlli positivi.
• Per applicazioni WB, prevedere una singola banda a circa 41 kDa; includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi per preservare la fosforilazione.
• È riportata reattività incrociata con topo e ratto; è consigliabile un allineamento delle sequenze del motivo T197 tra le specie per confermare la conservazione dell'epitopo.
• Negli esperimenti ELISA può essere vantaggioso utilizzare il fosfo-peptide per il coating e il peptide non fosforilato come controllo negativo per garantire la fosfo-selettività.

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