Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Fosfo-PKC alfa-T410+PKC delta-T410 per WB, ELISA - P17252 / Q05655

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PKC alfa e PKC delta

• PRKCA (PKC alfa) è una serina/treonina-proteina chinasi della famiglia PKC, attivata dal calcio e dipendente da fosfolipidi e DAG, che include anche PRKCD (PKC delta). Regola la proliferazione cellulare, l'apoptosi, la differenziazione, la migrazione e l'adesione, ed è altamente espresso in vari tumori, agendo come promotore tumorale.
• PRKCA fosforila substrati chiave come RAF1, BCL2 e TNNT2, modulando così la cascata di segnalazione MAPK/ERK e l'apoptosi. Ad esempio, la fosforilazione di BCL2 promuove la sopravvivenza cellulare nelle cellule leucemiche.
• PRKCA svolge un ruolo critico nella motilità cellulare: in seguito a una ferita, si trasloca alle lamelipodia e fosforila CSPG4, inducendo il riarrangiamento del citoscheletro e la migrazione polarizzata.
• La chinasi si localizza nel citoplasma, nella membrana cellulare, nella membrana mitocondriale e nel nucleo, e la traslocazione indotta da stimolo è vitale per le sue funzioni specifiche del contesto.
• La fosforilazione dell'anello di attivazione (T410 in PKC delta, equivalente in PKC alfa) è essenziale per l'attività chinasica. Questo anticorpo monoclonale riconosce specificamente PKC alfa e delta fosforilate in T410.
• Nel sistema cardiovascolare, PRKCA regola negativamente la contrattilità miocardica e promuove l'angiogenesi e l'ipertrofia dei cardiomiociti, in parte attraverso la segnalazione MAPK1/3, collegandola allo scompenso cardiaco.
• PRKCA fosforila DOCK8 per controllare CDC42 nella migrazione delle cellule T (PubMed:28028151) e fosforila KLHL3 nel trasporto ionico renale (PubMed:25313067). Attiva anche LRRK1 per regolare il traffico delle proteine RAB (PubMed:36040231). Riferimenti correlati:
  • PMID:28028151
  • PMID:25313067
  • PMID:36040231

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era un fosfopeptide sintetico corrispondente ai residui intorno alla T410 di PRKCZ umana, che condivide omologia con le sequenze dell'anello di attivazione di PKC alfa e delta. Gli utenti dovrebbero verificare che l'anticorpo riconosca le fosfoproteine attese nel loro sistema.
• Le applicazioni consigliate includono WB ed ELISA. Per il WB, i pesi molecolari previsti sono 76 kDa (PKC alfa) e 77 kDa (PKC delta). Utilizzare controlli positivi appropriati (ad es. cellule stimolate con PMA) e negativi (trattati con fosfatasi o non stimolati).
• Per confermare la specificità per la fosforilazione, considerare di eseguire un trattamento con fosfatasi dei lisati prima dell'analisi WB.
• Per l'ELISA, seguire i protocolli standard per gli anticorpi anti-fosfo e ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento per la sensibilità.
• Poiché l'anticorpo è un monoclonale di coniglio, offre alta riproducibilità e coerenza tra i lotti, adatto per studi quantitativi.

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