Anticorpo policlonale coniglio Phospho-PKC delta-Y311 per WB, ELISA - Q05655

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PKC delta

• PKC delta, codificata da PRKCD (conosciuta anche come nPKC-delta, MAY1, ALPS3, CVID9), è una serina/treonina proteina chinasi indipendente dal calcio, dipendente da fosfolipidi e diacilglicerolo.
• Svolge un doppio ruolo nella morte cellulare: agisce come chinasi pro-apoptotica nell'apoptosi indotta da danno al DNA e come chinasi anti-apoptotica nella morte cellulare iniziata dal recettore delle citochine; funziona anche come soppressore tumorale e promuove la sopravvivenza in alcuni tipi di cancro. Riferimenti correlati: PMID:21406692 PMID:21810427 PMID:15774464
• In seguito a danno al DNA, media l'attivazione della trascrizione di p53/TP53, l'apoptosi mitocondriale di BAX/BAK e la degradazione di MCL1; regola anche la progressione del ciclo cellulare sovraregolando CDKN1A/p21 e inibindo la ciclina A2, causando l'arresto G1/S, e fosforila CDK1 per il checkpoint G2/M. Riferimenti correlati: PMID:21406692 PMID:21810427
• Regola l'attività della NADPH ossidasi e la produzione di specie reattive dell'ossigeno nei neutrofili e eosinofili mediante fosforilazione diretta di NCF1/p47-phox e attraverso la segnalazione MAPK1/3 (ERK1/2). Riferimenti correlati: PMID:19801500 PMID:11748588
• Nelle piastrine, agisce come regolatore negativo della formazione di filopodi e della polimerizzazione dell'actina interagendo e regolando negativamente la fosforilazione di VASP; regola anche in modo differenziale la secrezione di granuli densi a valle dei recettori PAR e CD36. Riferimenti correlati: PMID:16940418 PMID:19587372
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, regione perinucleare, nucleo, membrana cellulare, mitocondri e sistema di membrane interne, riflettendo i suoi diversi ruoli di segnalazione.
• PKC delta è una fosfoproteina; la fosforilazione ai residui di tirosina (inclusa Tyr311) modula la sua attività chinasi, le interazioni proteiche e la ridistribuzione subcellulare.
• Fosforila molteplici substrati come MUC1, proteine 14-3-3, ELAVL1, PLSCR3, SMPD1 e GLI1, regolando la segnalazione della beta-catenina, la stabilità dell'mRNA, l'esposizione di cardiolipina, la secrezione di sfingomielina e la segnalazione di smoothened. Riferimenti correlati: PMID:11877440 PMID:18285462 PMID:12649167 PMID:17303575 PMID:19015273

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente a Tyr311 della PKC delta di ratto; questa sequenza è conservata nella PKC delta umana e di topo, supportando la reattività crociata.
• Per l'analisi Western blot, si consiglia di testare un intervallo di diluizioni dell'anticorpo e utilizzare inibitori della fosfatasi durante la lis cellulare per preservare la fosforilazione. Convalidare nel sistema di campioni pertinente, come lisati cellulari trattati con induttori di danno al DNA o PMA per monitorare la fosforilazione di PKC delta in Tyr311.
• Per le applicazioni ELISA, è possibile utilizzare l'anticorpo per la rilevazione di PKC delta fosforilata in estratti di cellule o tessuti. Includere controlli appropriati con peptide non fosforilato per confermare il legame specifico per la forma fosforilata.
• Poiché l'anticorpo reagisce con uomo e topo, può essere utilizzato per studi interspecie; verificare le prestazioni nel vostro contesto sperimentale specifico.

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