Anticorpo policlonale di coniglio anti-Fosfo-PKC (pan) (βII Ser660) per WB, ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P24723 / Q04759

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della PKC (pan) (βII Ser660)

• La famiglia PKC comprende multiple isoforme di chinasi serina/treonina (α, β, δ, ε, η, θ) che regolano processi cellulari chiave; questo anticorpo mira alla forma fosforilata di queste isoforme in un sito conservato corrispondente a Ser660 nella PKC α (PRKCA).
• La PKC α è attivata dal calcio, fosfolipidi e diacilglicerolo (DAG), e funziona sia nella regolazione positiva che negativa della proliferazione cellulare, apoptosi e migrazione.
• Nel cancro, la PKC α agisce come un proto-oncogene, promuovendo la crescita tumorale nei gliomi e nei tumori al seno, ed esercita effetti anti-apoptotici fosforilando BCL2 e sopprimendo le vie mediate da p53.
• Nel sistema immunitario, la PKC α regola la differenziazione dei macrofagi e la migrazione delle cellule T CD4+; fosforila DOCK8 per attivare CDC42 (PubMed:28028151). Riferimenti correlati: PMID:28028151
• La PKC α si sposta tra il citoplasma, la membrana plasmatica, la membrana mitocondriale e il nucleo, con la localizzazione subcellulare che influenza l'accesso ai substrati e la funzione.
• Nel sistema cardiovascolare, la PKC α regola l'ipertrofia dei cardiomiociti e la contrattilità attraverso vie che coinvolgono ERK1/2 e la fosforilazione della troponina cardiaca T (TNNT2).
• Le principali modifiche post-traduzionali includono autofosforilazione, trans-fosforilazione e acetilazione; la fosforilazione a Ser660 è un sito di regolazione critico per la piena attività chinasica.
• La PKC α è anche implicata nell'angiogenesi, nell'aggregazione piastrinica e nell'infiammazione, evidenziando i suoi diversi ruoli fisiologici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato sviluppato contro un peptide fosforilato; utilizzare inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione. Confermare la specificità fosfo-trattando i campioni con lambda fosfatasi o utilizzando controlli di blocco con peptide non fosforilato.
• Per il Western blot, ottimizzare le condizioni di blocco (ad es. BSA invece di latte) per ridurre il rumore di fondo. Iniziare con una diluizione dell'anticorpo di 1:500–1:2000 e regolare in base ai risultati preliminari.
• Come anticorpo policlonale, può riconoscere multiple isoforme PKC nell'intervallo di peso molecolare previsto; considerare siRNA specifici per isoforma o inibitori per confermare l'identità se necessario.
• Per l'ELISA, assicurare la compatibilità degli antigeni di rivestimento e validare con controlli positivi e negativi noti.
• Con reattività crociata verso topo e ratto, questo anticorpo è adatto per modelli roditori; verificare la reattività nel tessuto o linea cellulare specifica con controlli appropriati.

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