pAb di coniglio Phospho-PKCalpha/beta II-T638/641 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P17252 / P05771

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PKC alpha/beta II

• La protein chinasi C di tipo alfa (PKC alpha) è una serina/treonina-protein chinasi dipendente da calcio, fosfolipidi e diacilglicerolo codificata dal gene PRKCA. Svolge ruoli fondamentali nella regolazione della proliferazione cellulare, l'apoptosi, la differenziazione, la migrazione, l'adesione, la tumorigenesi, l'ipertrofia cardiaca, l'angiogenesi, la funzionalità piastrinica e l'infiammazione.
• PKC alpha si localizza nel citoplasma, sulla membrana cellulare, sulla membrana mitocondriale e nel nucleo, e si trasloca dinamicamente in compartimenti specifici dopo l'attivazione per esercitare le sue diverse funzioni.
• Durante la migrazione dei linfociti CD4+ indotta da chemochine, PKC alpha fosforila DOCK8, il fattore di scambio guanina di CDC42, determinandone la dissociazione da LRCH1 e la successiva attivazione della GTPasi CDC42, promuovendo quindi la motilità cellulare. Riferimenti correlati: PMID:28028151
• In risposta alla segnalazione dell'angiotensina II, PKC alpha fosforila KLHL3 in corrispondenza di 'Ser-52', riducendo l'interazione tra KLHL3 e WNK4, modulando così il trasporto ionico e la regolazione della pressione arteriosa. Riferimenti correlati: PMID:25313067
• PKC alpha fosforila e attiva LRRK1, che a sua volta fosforila le proteine RAB coinvolte nel traffico intracellulare, evidenziando un ruolo nel trasporto vescicolare. Riferimenti correlati: PMID:36040231
• È altamente espresso in diversi tipi di cancro, inclusi gliomi e carcinomi mammari, dove agisce come promotore tumorale ed è implicito nei fenotipi maligni attraverso la regolazione della proliferazione cellulare, l'apoptosi e la migrazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno a T638 della PKCalpha/beta II umana. Si consiglia di convalidare l'anticorpo nel proprio sistema sperimentale trattando le cellule con PMA o altri attivatori della PKC per aumentare la fosforilazione in T638/641 prima dell'analisi.
• Per il Western blotting, utilizzare inibitori di fosfatasi appropriati durante la preparazione del campione per preservare l'epitopo fosforilato. È prevista una banda intorno a 76–77 kDa.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), eseguire il recupero dell'antigene come richiesto e aggiungere inibitori di fosfatasi nelle fasi di incubazione per mantenere i segnali di fosforilazione.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), monitorare la traslocazione della PKC fosforilata dal citoplasma alla membrana dopo l'attivazione come controllo positivo.
• Nell'ELISA, convalidare la specificità utilizzando sia peptidi fosforilati che non fosforilati per confermare la fosfo-specificità.

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