PAb coniglio Phospho-PKCδ/θ-S643/676 - Q05655/Q04759

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina chinasi C di tipo delta

• La proteina chinasi C delta (PKCδ), codificata dal gene PRKCD, è una serina/treonina proteina chinasi calcio-indipendente, dipendente da fosfolipidi e diacilglicerolo (DAG), appartenente alla sottofamiglia delle PKC nuove. È anche nota come nPKC-delta e possiede attività tirosina-proteina chinasi.
• PKCδ svolge un doppio ruolo nell'apoptosi: agisce come proteina pro-apoptotica durante l'apoptosi indotta da danno al DNA e come proteina anti-apoptotica durante la morte cellulare iniziata dai recettori delle citochine. Riferimenti correlati: PMID:21406692, PMID:21810427
• Funge da regolatore della proliferazione dei linfociti B ed è fondamentale per l'induzione della tolleranza ai self-antigeni nei linfociti B.
• In risposta allo stress ossidativo, PKCδ fosforila e attiva CHUK/IKKA nel nucleo, portando alla fosforilazione di p53/TP53 e alla segnalazione apoptotica a valle. Riferimenti correlati: PMID:21406692, PMID:21810427
• PKCδ mostra ruoli contrastanti nel cancro: può agire come soppressore tumorale dopo stimolazione mitogenica, ma è altamente espresso in molti tumori, promuovendo la sopravvivenza cellulare e la chemioresistenza attraverso vie di segnalazione tra cui NF-kappa-B, AKT1 e MAPK1/3. Riferimenti correlati: PMID:15774464
• È necessario per l'attività della NADPH ossidasi e la produzione di anione superossido nei neutrofili e negli eosinofili, coinvolgendo la fosforilazione di NCF1 (p47-phox). Riferimenti correlati: PMID:19801500, PMID:11748588
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, regione perinucleare, nucleo, membrana cellulare, mitocondri e sistema di membrane interne, che riflette i suoi ruoli dinamici nella segnalazione.
• PKCδ contiene domini caratteristici a dito di zinco di tipo forbolo estero/DAG ed è soggetta a splicing alternativo, fosforilazione e altre modifiche post-traduzionali che regolano la sua funzione e distribuzione subcellulare.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Poiché questo anticorpo è prodotto contro un fosfopeptide sintetico corrispondente a Ser643 della PKCδ umana (che condivide omologia con Ser676 della PKCθ), è previsto che riconosca specificamente le forme fosforilate di entrambe le chinasi. Si consiglia di confermare la reattività incrociata con il bersaglio specifico nel proprio sistema modello.
• Per Western blot, i pesi molecolari previsti sono 77 kDa e altre isoforme (67, 74, 80, 81 kDa) dovute a splicing alternativo e modifiche post-traduzionali. Includere lisati trattati con fosfatasi come controllo negativo per verificare la fosfo-specificità.
• L'attivazione e la fosforilazione di PKCδ a livello di Ser643 possono essere stimolate da forbol esteri (es. PMA), stress ossidativo (es. H2O2) o agenti danneggianti il DNA. Prevedere condizioni di stimolazione appropriate quando si preparano lisati cellulari o tissutali.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la rilevazione di fosfo-PKCδ/θ in lisati cellulari o proteine purificate. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione secondo le procedure standard.

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