pAb di coniglio Phospho-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783 per WB, ELISA - P19174

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Phospho-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783

• PLCG1 codifica per la 1-fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato fosfodiesterasi gamma-1, un enzima chiave nella segnalazione dei fosfoinositidi. Idrolizza il PIP2 per generare i secondi messaggeri DAG e IP3, che mobilizzano il calcio e attivano la proteina chinasi C.
• È attivato a valle delle recettori tirosin-chinasi (es. PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFR), svolgendo un ruolo fondamentale nella trasduzione dei segnali dei fattori di crescita verso le vie intracellulari.
• PLCG1 partecipa alla riorganizzazione dell'actina e alla migrazione cellulare, come dimostrato dalla sua necessità per una chemiotassi efficiente (PubMed:17229814). Riferimenti correlati: PMID:17229814
• La proteina si localizza nei lamellipodi e nelle rughe membrane, strutture dinamiche sul bordo di avanzamento delle cellule in migrazione, confermando il suo ruolo nella regolazione del citoscheletro.
• PLCG1 contiene domini SH2 e SH3 che mediano le interazioni con i residui di tirosina fosforilati sulle recettori attivate, ed essa stessa è fosforilata su residui di tirosina chiave (inclusa la Y783) per la piena attivazione.
• È soggetta a diverse modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione e acetilazione, ed è classificata come fosfoproteina, idrolasi e trasduttore.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo è prodotto contro un peptide fosforilato; pertanto riconosce specificamente la PLCG1 fosforilata nella posizione Y783. Per i controlli negativi, trattare i campioni con lambda fosfatasi o usare la competizione con peptide non fosforilato per confermare la specificità.
• In Western blot, il peso molecolare previsto della PLCG1 è di ~149 kDa. Assicurare una separazione adeguata delle proteine ad alto peso molecolare utilizzando una percentuale di gel appropriata (es. SDS-PAGE al 6-8%) e condizioni di trasferimento adatte.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di rilevazione in un formato ELISA sandwich fosfo-specifico. Validare l'uso nel sistema di campioni pertinente, ad esempio lisati cellulari stimolati vs non stimolati.
• Quando si rileva la fosforilazione endogena di PLCG1, considerare di stimolare le cellule con fattori di crescita (es. EGF, PDGF) noti per attivare le recettori tirosin-chinasi che fosforilano PLCG1 sulla Y783.
• È indicata la reattività crociata con il topo; tuttavia, confermare la reattività nel vostro modello sperimentale specifico e validare l'anticorpo per altre specie se necessario.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale di coniglio, può verificarsi variabilità tra lotti; includere controlli appropriati e titolare la concentrazione per ottenere il risultato ottimale.

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