Anticorpo Policlonale di Coniglio Phospho-PLN-S16/T17 per WB, ELISA - P26678

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Fosfolambano

• La Fosfolambano (PLN) è un regolatore chiave della contrattilità del muscolo cardiaco, codificata dal gene PLN, con un peso molecolare di circa 6 kDa (UniProt: P26678).
• Inibisce reversibilmente la sarco/endoplasmic reticulum Ca2+-ATPase 2 (SERCA2/ATP2A2) nel reticolo sarcoplasmatico cardiaco, riducendo l'apparente affinità per il Ca2+ della pompa, in particolare durante la diastole. Riferimenti correlati: PMID:28890335
• La fosforilazione di PLN su Ser16 e Thr17 allevia l'inibizione di SERCA2, promuovendo la ricaptazione del Ca2+ nel reticolo sarcoplasmatico e accelerando il rilassamento muscolare.
• A livello subcellulare, la PLN si localizza nel reticolo endoplasmatico, nel reticolo sarcoplasmatico e nelle membrane mitocondriali, in linea con i suoi ruoli nella gestione intracellulare del Ca2+.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione (su Ser16/Thr17), acetilazione e palmitoilazione, che ne modulano l'attività e l'associazione alla membrana.
• La PLN è espressa prevalentemente nel muscolo cardiaco, ma svolge ruoli anche negli spermatidi allungati e nel nucleo reticolare talamico del cervello, influenzando rispettivamente la differenziazione delle cellule germinali e i modelli di sonno.
• Le mutazioni in PLN sono associate a cardiomiopatie (CMD1P, CMH18), sottolineando il suo ruolo critico nella funzione cardiaca.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Poiché l'immunogeno è un fosfo-peptide sintetico che comprende Ser16 e Thr17, si prevede che l'anticorpo riconosca specificamente la forma doppiamente fosforilata della PLN; convalidare la specificità utilizzando controlli defosforilati o il trattamento con fosfatasi in sistemi campione rilevanti.
• Per l'analisi Western blot, utilizzare marcatori di basso peso molecolare e considerare gel Tris-Tricina al 15-20% per risolvere la banda della PLN a 6 kDa; includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione.
• Per l'ELISA, il rivestimento con coniugati di fosfo-peptidi e l'uso di peptidi competitivi o bloccanti possono aiutare a confermare la specificità per la forma fosforilata.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo empiricamente per ogni applicazione; si raccomanda l'inclusione di appropriati controlli positivi e negativi per confermare la reattività dipendente dalla fosforilazione.

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