Anticorpo policlonale di coniglio anti-Fosfo-PPP1R12A/PPP1R12B/PPP1R12C (Thr696) per WB, ELISA - O14974 / O60237 / Q9BZL4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PPP1R12A/PPP1R12B/PPP1R12C

• PPP1R12A (noto anche come MYPT1) è una subunità regolatoria chiave della proteina fosfatasi 1 (PP1), mirando la subunità catalitica (PPP1C) a substrati specifici.
• Media il legame con la miosina e regola la dinamica del citoscheletro, in particolare nelle fibre di stress, come parte del complesso fosfatasi della miosina.
• La proteina contiene ripetizioni ANK ed è coinvolta nella defosforilazione di PLK1, influenzando la progressione del ciclo cellulare.
• PPP1R12A può inibire la soppressione dipendente da HIF1AN di HIF1A, modulando così le vie di risposta all'ipossia.
• L'espressione è prominente nei muscoli striati, specialmente nelle fibre di tipo 2a, indicando un ruolo nella regolazione della contrazione muscolare.
• Il gene subisce splicing alternativo, producendo isoforme funzionalmente distinte.
• Parole chiave: Fosfoproteina, idrossilazione e sequenziamento proteico diretto; evidenziando le modifiche post-traduzionali che regolano la sua attività.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato corrispondente ai residui circostanti la Thr696 di PPP1R12A umana. Questo sito è conservato in PPP1R12B e PPP1R12C.
• Per il Western blot, includere inibitori delle fosfatasi nel tampone di lisi per preservare lo stato di fosforilazione. Considerare l'uso di lisati trattati con fosfatasi come controllo negativo.
• Validare la specificità dell'anticorpo in linee cellulari umane pertinenti note per esprimere questi bersagli della fosfatasi della miosina, come le cellule HeLa o A431.
• La fosforilazione a Thr696 può essere indotta da stimoli specifici; l'ottimizzazione delle condizioni di stimolazione può migliorare il rilevamento del segnale.
• Per l'ELISA, utilizzare rivestimento con antigene peptide fosforilato e confrontare con il peptide non fosforilato per confermare la specificità.

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