Fosfo-PRKCQ-S676 Coniglio pAb - Q04759

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PRKCQ

• PRKCQ (Proteina chinasi C theta tipo), nota anche come nPKC-theta, è una serina/treonina proteina chinasi indipendente dal calcio, dipendente da fosfolipidi e diacilglicerolo, codificata dal gene PRKCQ. Svolge ruoli non ridondanti nella segnalazione del recettore delle cellule T (TCR), essenziale per l'attivazione, la proliferazione, la differenziazione e la sopravvivenza delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:21964608
• Nelle cellule T co-stimolate con TCR-CD3/CD28, PRKCQ è richiesta per l'attivazione di NF-kappa-B e JUN, portando alla produzione di IL2, e partecipa alla transattivazione dipendente dal calcio di NFATC1 e NFATC2. Riferimenti correlati: PMID:21964608
• PRKCQ fosforila direttamente CARD11 sui residui di serina, promuovendo l'associazione di CARD11 con i lipid raft e il reclutamento del complesso BCL10-MALT1 per attivare la via canonica NF-kappa-B. Fosforila anche STK39/SPAK per mediare l'attivazione di JUN. Riferimenti correlati: PMID:21964608
• Oltre alle cellule T, PRKCQ regola la trasduzione del segnale nelle piastrine a valle dei recettori ITGA2B, CD36/GP4, F2R/PAR1 e F2RL3/PAR4, svolgendo un ruolo positivo nella segnalazione "outside-in" e nella secrezione di granuli. Può anche inibire la segnalazione dell'insulina fosforilando IRS1. Inoltre, PRKCQ fosforila MSN, PDPK1, CCDC88A/GIV e LRRK1, influenzando vari processi cellulari. Riferimenti correlati: PMID:23509302, PMID:36040231
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica, con translocazione dipendente dallo stimolo alla membrana cellulare, coerente con il suo ruolo nella trasduzione di segnali dai recettori di superficie cellulare.
• L'espressione tissutale è prominente nel muscolo scheletrico, nelle cellule T, nelle cellule megacarioblastiche e nelle piastrine, allineandosi con le sue funzioni chiave nelle cellule immunitarie e nel muscolo.
• Questo anticorpo è sviluppato contro un fosfo-peptide corrispondente ai residui circostanti la serina 676 di PRKCQ umano, consentendo il rilevamento specifico della forma fosforilata. La serina 676 è un critico sito di fosforilazione coinvolto nell'attivazione di PRKCQ e nella segnalazione a valle.
• Le modifiche post-traduzionali di PRKCQ includono la fosforilazione, l'ubiquitinazione e la formazione di legami isopeptidici, come indicato dalle parole chiave Fosfoproteina, Legame isopeptidico e Coniugazione Ubl. La proteina presenta anche domini a dito di zinco, legame ATP e attività chinasica.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per le applicazioni Western blot, includere inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi per preservare lo stato di fosforilazione di PRKCQ a Ser-676.
• La natura fosfo-specifica dell'anticorpo richiede un'attenta validazione; considerare l'uso di un controllo di blocco con peptide non fosforilato o un trattamento con fosfatasi per confermare la specificità.
• Nell'ELISA, il rivestimento con peptidi fosforilati rispetto a non fosforilati può aiutare a valutare la selettività dell'anticorpo.
• Come anticorpo policlonale di coniglio, il rilevamento richiede un coniugato secondario anti-IgG di coniglio; ottimizzare empiricamente le diluizioni dell'anticorpo primario e secondario per ogni saggio.
• Dato il peso molecolare di 82 kDa di PRKCQ, scegliere percentuali di gel appropriate e condizioni di trasferimento per garantire una risoluzione e un rilevamento efficienti.

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