mAb di coniglio Phospho-Rac1/Cdc42-S71 per WB, ELISA - P60953 / P63000

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di Phospho-Rac1/Cdc42-S71

Questo anticorpo riconosce la serina 71 fosforilata sia di Rac1 che di CDC42 umani. Il seguente background si concentra su CDC42 (P60953), un membro chiave della famiglia delle Rho GTPasi.

• La proteina omologa 42 del controllo della divisione cellulare (CDC42) è una piccola GTPasi associata alla membrana plasmatica che cicla tra lo stato attivo legato al GTP e quello inattivo legato al GDP, regolando diversi processi cellulari.
• Il CDC42 attivo si lega alle proteine effettrici per regolare la polarizzazione delle cellule epiteliali, l'attacco del fuso bipolare durante la mitosi (PubMed:15642749) e la migrazione cellulare (PubMed:17038317; PubMed:22843693). Riferimenti correlati: PMID:15642749 PMID:17038317 PMID:22843693
• Nei neuroni, CDC42 promuove la formazione di filopodi e la plasticità strutturale delle spine dendritiche, trasmettendo i segnali di CaMKII per la modulazione a lungo termine specifica della sinapsi (PubMed:14978216). Riferimenti correlati: PMID:14978216
• Necessario per la formazione delle spine mediata da DOCK10 nelle cellule di Purkinje e nei neuroni dell'ippocampo, e facilita la formazione di filopodi e podosomi dipendente da DOCK11 nei podociti (PubMed:33523862). Riferimenti correlati: PMID:33523862
• È coinvolto nella fagocitosi organizzando il citoscheletro di F-actina per formare le coppe fagocitiche (PubMed:26465210) e nel rimodellamento delle giunzioni tra cellule epiteliali tramite l'attivazione di PLEKHG4B (PubMed:33310911). Riferimenti correlati: PMID:26465210 PMID:33310911
• Regola negativamente la polimerizzazione di SEPTIN12, con un potenziale impatto sulla spermatogenesi (PubMed:30189608). Riferimenti correlati: PMID:30189608
• Subcellolarmente, CDC42 si localizza sulla membrana cellulare, nel citoplasma, sul centrosoma, sul fuso mitotico, sul corpo intermedio, sulle dendriti e sulle vescicole secretorie come gli acrosomi.
• Viene modificato post-traduzionale tramite fosforilazione, prenilazione, metilazione e ubiquitinazione; è stato identificato come fosfoproteina in studi di proteomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico intorno alla S71 di Rac1/Cdc42 umano. Verificare la reattività nel proprio sistema di campioni, specialmente se si lavorano altri membri della famiglia delle Rho GTPasi a causa dell'omologia di sequenza.
• Adatto per Western blotting (WB) ed ELISA; in WB, è possibile rilevare una banda specifica intorno ai 24 kDa nei lisati di cellule umane. Utilizzare controlli trattati con fosfatasi o condizioni di induzione/digiuno per confermare la fosfo-specificità.
• Per ELISA, il rivestimento con peptidi fosforilati rispetto a peptidi non fosforilati può aiutare a valutare il legame fosfo-specifico.
• Le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate empiricamente; un intervallo di partenza tipico per WB è 1:500–1:2000, ma si raccomanda una titolazione specifica per lotto.
• Conservare a -20°C; spedito con sacchetti di ghiaccio. Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento per mantenere l'attività.

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