Anticorpo Monoclonale di Coniglio Fosfo-Raptor-Ser792 per WB, ELISA - Q8N122

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina Regolatoria Associata a mTOR

• RPTOR è un componente chiave del complesso 1 del bersaglio meccanicistico della rapamicina (mTORC1), che agisce come un sensore centrale dei nutrienti stimolando le reazioni anaboliche e la crescita cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• In risposta a nutrienti e fattori di crescita, mTORC1 viene reclutato sulla membrana lisosomiale, dove RPTOR media questo reclutamento tramite interazione con le GTPasi Rag. Riferimenti correlati: PMID:12747827 PMID:24403073 PMID:26588989
• RPTOR promuove la specificità del substrato legandosi a proteine contenenti il motivo TOS e dirigendole verso il dominio chinasi di MTOR per la fosforilazione, inclusi i principali effettori a valle RPS6KB1 ed EIF4EBP1. Riferimenti correlati: PMID:12747827
• mTORC1 inibisce anche le vie cataboliche fosforilando i componenti di inizio dell'autofagia ULK1 e ATG13, nonché il fattore di trascrizione TFEB. Riferimenti correlati: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• La proteina si localizza sulla membrana lisosomiale, nel citoplasma e nei granuli citoplasmatici, in linea con il suo ruolo dinamico nella percezione dei nutrienti.
• RPTOR è una fosfoproteina (come indicato dalla sua annotazione di parola chiave), soggetta a modificazioni post-traduzionali regolatorie; sono state osservate anche acetilazione e ubiquitinazione.
• Altamente espresso nel muscolo scheletrico, con espressione inferiore nel cervello, polmone, intestino tenue, rene e placenta; ampiamente espresso in vari tessuti con i livelli più alti nella mucosa nasale e nell'ipofisi.
• Gli alias del gene includono KOG1 e Mip1; la proteina è anche nota come proteina ponteggi (scaffold) p150 bersaglio della rapamicina (TOR).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente al sito Ser792 fosforilato; per il WB, utilizzare linee cellulari umane come HeLa o HEK293 note per esprimere RPTOR.
• Convalidare la fosfo-specificità trattando i lisati cellulari con fosfatasi lambda per confermare la perdita del segnale, o utilizzando la competizione con peptide non fosforilato in ELISA.
• Per l'ELISA, considerare di rivestire con il peptide fosforilato e rilevare con l'anticorpo; ottimizzare la concentrazione di rivestimento e le condizioni di blocco.
• RPTOR è una proteina grande (~149 kDa); assicurare un trasferimento proteico adeguato e utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. SDS-PAGE 6-8%) per il WB.

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