Anticorpo Policlonale di Coniglio Phospho-RB-S608 per WB, ELISA - P06400

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RB1

• RB1 (proteina associata al retinoblastoma) è un soppressore tumorale che controlla la progressione del ciclo cellulare regolando la transizione G1/S, principalmente attraverso la sua interazione con i fattori di trascrizione E2F. Riferimenti correlati: PMID:10499802
• La forma ipofosforilata di RB1 lega e inibisce gli E2F, mentre la fosforilazione mediata da CDK (es. in Ser608) interrompe questa interazione, permettendo la trascrizione dipendente da E2F e l'ingresso in fase S. Riferimenti correlati: PMID:10499802
• RB1 promuove anche la transizione G0-G1 tramite fosforilazione da parte di CDK3/ciclina-C. Riferimenti correlati: PMID:15084261
• RB1 recluta metiltransferasi istoniche e mantiene la struttura dell'eterocromatina, in particolare la trimetilazione di H4K20, e media la repressione trascrizionale attraverso il reclutamento di HDAC.
• RB1 è espressa nella retina e nei cheratinociti del prepuzio (a livello proteico), con localizzazione subcellulare sia nel nucleo che nel citoplasma. Riferimenti correlati: PMID:20940255
• Oncoproteine virali come l'antigene T grande di SV40, HPV E7 e adenovirus E1A legano RB1, interrompendo i complessi RB1-E2F e contribuendo alla trasformazione cellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato corrispondente a Ser608 di RB1 umana; per una rilevazione ottimale, considerare l'uso di lisati proteici da linee cellulari con noto stato di espressione e fosforilazione di RB1.
• Le proteine fosforilate sono labili; includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi e saggio per preservare l'epitopo fosfo.
• Per il Western blotting, è raccomandato un passaggio di riduzione con DTT o β-mercaptoetanolo; validare l'anticorpo nel sistema campione rilevante, poiché potrebbe verificarsi reattività crociata con RB1 non fosforilata.
• Per l'ELISA, è possibile ottimizzare formati diretti o sandwich; abbinare a un anticorpo per RB1 totale per normalizzare i segnali di fosforilazione.

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