Anticorpo policlonale di coniglio Phospho-RB-S811 per WB, ELISA - P06400

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RB

• RB è una proteina soppressore tumorale che regola criticamente la transizione G1/S del ciclo cellulare controllando la trascrizione dipendente da E2F. Riferimenti correlati: PMID:10499802
• Nella sua forma ipofosforilata, RB lega i fattori di trascrizione E2F, bloccando fisicamente il loro dominio di transattivazione e reclutando enzimi che modificano la cromatina per reprimere la trascrizione genica. Riferimenti correlati: PMID:10499802
• La fosforilazione di RB mediata da ciclina/CDK ne induce il distacco dagli E2F, consentendo la trascrizione dei geni della fase S e la progressione del ciclo cellulare; la fosforilazione da parte di CDK3/ciclina-C promuove specificamente la transizione G0-G1. Riferimenti correlati: PMID:10499802 PMID:15084261
• RB contribuisce anche alla formazione dell'eterocromatina stabilizzando la metilazione degli istoni e reclutando metiltransferasi istoniche come SUV39H1, mantenendo così la struttura dell'eterocromatina costitutiva.
• A livello subcellulare, RB si localizza principalmente nel nucleo ma può essere rilevato anche nel citoplasma.
• Modificazioni post-traduzionali come fosforilazione, acetilazione e metilazione regolano l'attività di RB; le oncoproteine virali (es. antigene T grande di SV40, HPV E7) possono interrompere i complessi RB-E2F, evidenziando il suo ruolo nelle interazioni ospite-virus.
• L'espressione tissutale include la retina e i cheratinociti del prepuzio (a livello proteico). Riferimenti correlati: PMID:20940255

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per l'analisi Western blot, includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi per preservare la fosforilazione di RB in Ser811.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo mediante saggio di competizione con il peptide immunogeno fosforilato o mediante trattamento con fosfatasi dei lisati cellulari.
• Selezionare linee cellulari o campioni tissutali con fosforilazione nota di RB in Ser811 (es. linee cellulari tumorali in ciclo) come controlli positivi.
• Per applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo per determinare le condizioni ottimali di rivestimento e rilevamento, eseguendo saggi con curva standard con fosfo-peptide e controlli non fosforilati per confermare la specificità.

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