Phospho-RPA2-S4/S8 Anticorpo Policlonale di Coniglio pAb - P15927

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Subunità 32 kDa della Proteina di Replicazione A

• La subunità 32 kDa della proteina di replicazione A (RPA2, anche nota come RPA32, RP-A p32, RP-A p34) è un componente del complesso eterotrimerico della proteina di replicazione A (RPA), che include RPA1, RPA2 e RPA3.
• RPA lega e stabilizza gli intermedi di DNA a singolo filamento (ssDNA) generati durante la replicazione del DNA e lo stress del DNA, prevenendo il ri-annealing e facilitando il reclutamento di proteine del metabolismo del DNA.
• Nella risposta cellulare al danno del DNA, RPA è cruciale per la riparazione del DNA e l'attivazione del checkpoint. Recluta il complesso chinasi ATR-ATRIP ai siti di danno del DNA, innescando la cascata di risposta al danno del DNA.
• RPA recluta fattori chiave di riparazione alla cromatina, inclusi RAD51 e RAD52 per la riparazione delle rotture a doppio filamento, nonché XPA e XPG per la riparazione per escissione di nucleotidi (NER). Partecipa anche alla riparazione per escissione di basi (BER) tramite interazione con UNG.
• RPA stimola l'attività elicasi 5'-3' di BRIP1/FANCJ, coinvolta nella riparazione dei crosslink intercatena.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17596542
• RPA si localizza principalmente nel nucleo e si trova nei corpi PML, in linea con i suoi ruoli nel metabolismo del DNA.
• RPA2 è una fosfoproteina soggetta a varie modificazioni post-traduzionali, inclusa acetilazione, ubiquitinazione e splicing alternativo, che ne regolano la funzione nella segnalazione del danno al DNA.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno a S4 e S8 di RPA2 umana. Per la conferma in Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari trattati con fosfatasi per verificare la perdita del segnale fosfo-specifico.
• Il peso molecolare previsto di RPA2 non modificata è 29 kDa; tuttavia, la fosforilazione o altre modifiche possono influenzare la migrazione. Utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e validare nel proprio sistema campione.
• Questo anticorpo è raccomandato per WB ed ELISA. Per l'ELISA, titolare l'anticorpo per determinare la diluizione di lavoro ottimale e includere un controllo con peptide non fosforilato per garantire la specificità.
• È stata segnalata reattività crociata con RPA2 di ratto; se si utilizzano campioni di ratto, validare le prestazioni nelle proprie condizioni sperimentali.

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