mAb coniglio Phospho-Rpb1 CTD-S2/S5 - P24928

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della subunità RPB1 della RNA polimerasi II diretta da DNA

• La subunità RPB1 della RNA polimerasi II diretta da DNA (conosciuta anche come POLR2A) è la componente catalitica e la più grande della RNA polimerasi II, responsabile della sintesi dei precursori dell'mRNA e di molti RNA non codificanti funzionali. Riferimenti correlati: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596
• Il ciclo di trascrizione della Pol II comprende inizio, elongazione e terminazione. Durante l'iniziazione, il complesso di pre-iniziazione si assembla sui promotori; l'elongazione prevede la sintesi processiva dell'RNA; la terminazione rilascia il trascritto. Riferimenti correlati: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:28108474
• L'enzima catalizza l'aggiunta di nucleotidi tramite un meccanismo a due ioni metallici, dove POLR2A contribuisce con un motivo DxDGD che coordina il Mg²⁺ e POLR2B fornisce una coordinazione aggiuntiva. Riferimenti correlati: PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112
• Possiede attività di proofreading esonucleasica 3'→5', che permette la rimozione di nucleotidi incorporati erroneamente. Riferimenti correlati: PMID:8381534
• L'esclusivo dominio C-terminale (CTD) è costituito da 52 ripetizioni di eptapeptide (YSPTSPS) e subisce una fosforilazione dinamica, principalmente alle Serina 2 e Serina 5, che regola la fuga dal promotore, l'elongazione e la lavorazione dell'mRNA. Riferimenti correlati: PMID:24207025 PMID:26124092
• L'acetilazione e la metilazione delle lisine nel CTD bilanciano l'espressione genica: l'acetilazione promuove la trascrizione dei geni indotti da fattori di crescita, mentre la metilazione generalmente reprime l'espressione. Riferimenti correlati: PMID:24207025 PMID:26124092
• Inoltre, RPB1 può funzionare come RNA-dipendente RNA polimerasi, estendendo gli RNA non codificanti, e agisce nella replicazione del virus dell'epatite delta.
• Localizzazione subcellulare: prevalentemente nucleare, ma viene trovata anche nel citoplasma ed è associata ai cromosomi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Quando eseguisci la Western blot, assicurati che i tamponi di lisi contengano inibitori delle fosfatasi per preservare la fosforilazione del CTD. Includi un controllo trattato con fosfatasi per confermare la fosfo-specificità.
• Per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) e il CUT&Tag, questo anticorpo può aiutare a profilare l'occupazione della RNA polimerasi II e i pattern di fosforilazione di Ser2/Ser5 lungo tutto il genoma.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per quantificare i livelli di POLR2A fosforilata in lisati o campioni purificati.

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