mAb coniglio Phospho-Rpb1 CTD-T4 per WB, ELISA - P24928

Specifiche e parametri principali del prodotto

Informazioni biologiche: Funzione e localizzazione della sottounità RPB1 della RNA polimerasi II diretta da DNA

• La sottounità RPB1 della RNA polimerasi II diretta da DNA è il nucleo catalitico della Pol II, responsabile della sintesi dei precursori dell'mRNA e degli RNA non codificanti in un ciclo di trascrizione che comprende inizio, allungamento e terminazione. Riferimenti correlati: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474
• RPB1 forma il centro attivo con la sottounità RPB2, catalizza l'aggiunta di nucleotidi tramite un motivo DxDGD coordinato da Mg²⁺ e corregge i nucleotidi inseriti erroneamente tramite attività esonucleasica 3′→5′. Riferimenti correlati: PMID:8381534, PMID:9852112, PMID:30190596
• Il dominio C-terminale (CTD) unico di RPB1, composto da 52 ripetizioni di eptapeptidi, funge da piattaforma dinamica per i processi accoppiati alla trascrizione; la fosforilazione sulla Ser5 promuove l'uscita dal promotore, mentre la fosforilazione sulla Ser2 è fondamentale per l'allungamento e il processing del pre-mRNA. L'acetilazione e la metilazione delle lisine del CTD regolano ulteriormente l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:24207025, PMID:26124092
• Oltre alla trascrizione dipendente dal DNA, RPB1 possiede attività di RNA polimerasi dipendente da RNA che estende gli RNA non codificanti e può agire come replicasi/transcriptasi per il virus dell'epatite delta.
• RPB1 si localizza principalmente nel nucleo e sui cromosomi, ma può essere trovato anche nel citoplasma.
• Le modifiche post-traduzionali di RPB1 includono fosforilazione, acetilazione, metilazione, ubiquitinazione e ISGilazione, che regolano la sua attività e le sue interazioni.
• Le mutazioni in POLR2A sono associate a disturbi dello sviluppo neurologico, inclusa la disabilità intellettiva (NEDHIB).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Durante l'esecuzione del Western blotting, includi inibitori di fosfatasi nei buffer di lisi per preservare la fosforilazione di T4 e utilizza un gel di separazione a gradiente o ad alta percentuale per separare chiaramente la banda da 217 kDa.
• Per ELISA, considera la copertura con un peptide fosforilato o estratti proteici arricchiti di fosfati per confermare la specificità per l'epitopo modificato.
• La reattività crociata dell'anticorpo con umano, topo e ratto suggerisce un motivo T4 conservato; valida nella specie e nel tipo di campione rilevanti per il tuo sistema sperimentale.

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