Anticorpo policlonale di coniglio Fosfo-Smad2-S465/S467 per WB, ELISA - Q15796

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Smad2

• Smad2, noto anche come MADH2, MADR2 o JV18-1, è un membro della famiglia dei SMAD regolati dal recettore (R-SMAD), agendo come trasduttore di segnale intracellulare a valle dei recettori del TGF-beta e dell'activina.
• Dopo la fosforilazione in S465 e S467 da parte delle chinasi del recettore di tipo 1, Smad2 forma un complesso con Smad4, si trasloca nel nucleo e si lega all'elemento TRE per regolare la trascrizione dei geni responsivi al TGF-beta.
• Smad2 promuove la trascrizione mediata da TGFB1 dei geni di differenziazione odontoblastica nelle cellule della papilla dentale e regola positivamente l'attività chinasica di PDPK1 dissociandola da YWHAQ (proteina 14-3-3).
• Può funzionare come soppressore tumorale nel carcinoma del colon-retto (PubMed:8752209). Riferimenti correlati: PMID:8752209
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica in condizioni basali, ma si sposta nel nucleo dopo l'attivazione, in linea con il suo ruolo nella trasduzione del segnale.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione (critica per l'attivazione), acetilazione e ubiquitinazione (coniugazione Ubl). La proteina contiene un dominio legante lo zinco ed è soggetta a splicing alternativo.
• Smad2 è altamente espresso nel muscolo scheletrico, nelle cellule endoteliali, nel cuore e nella placenta, riflettendo il suo ampio ruolo nello sviluppo e nell'omeostasi tissutale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato che comprende S465 e S467 di Smad2 umano; pertanto, l'anticorpo riconosce probabilmente la forma doppiamente fosforilata (attiva). Per preservare la fosforilazione dell'epitopo, aggiungere inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione.
• Per il Western blot (WB), utilizzare un SDS-PAGE riducente e trasferire su PVDF; considerare l'ottimizzazione del blocco e della diluizione dell'anticorpo utilizzando lisati cellulari pertinenti trattati con TGF-beta1 o un controllo con inibitore della fosfatasi.
• Per l'ELISA, utilizzare un sistema di rilevamento fosfo-specifico e convalidare con saggi di competizione con peptide per confermare la specificità.
• Convalidare la reattività incrociata con campioni di topo, poiché la reattività è prevista; eseguire un allineamento specie-specifico dell'epitopo se necessario per altre specie.

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