Anticorpo monoclonale di coniglio Phospho-STAT1-Y701 per WB e ELISA - P42224

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di STAT1

• Trasduttore di segnale e attivatore trascrizionale che media le risposte cellulari agli interferoni (IFN), alla citochina KITLG/SCF e ad altre citochine e fattori di crescita. Svolge un ruolo centrale nelle cascate di segnalazione JAK-STAT. Riferimenti bibliografici: PMID:12764129, PMID:12855578, PMID:15322115
• Dopo la stimolazione con IFN di tipo I (IFN-alfa/beta), STAT1 viene fosforilato sulla tirosina Y701 dalle chinasi JAK, dimerizza con STAT2 e IRF9 per formare il complesso ISGF3, che si trasloca nel nucleo e lega gli elementi ISRE per indurre l'espressione di geni stimolati dall'interferone (ISG) e stabilire uno stato antivirale. Riferimenti bibliografici: PMID:28753426, PMID:35568036
• In risposta all'IFN di tipo II (IFN-gamma), STAT1 forma un omodimero (GAF) che lega gli elementi GAS, promuovendo la trascrizione dei geni target. Le fosforilazioni su tirosina e serina sono fondamentali per questa attivazione. Riferimenti bibliografici: PMID:8156998, PMID:26479788
• Attivato dalla via di segnalazione KITLG/SCF-KIT, estendendo il suo ruolo oltre gli interferoni. Riferimenti bibliografici: PMID:15526160
• Partecipa alla segnalazione mediata da FGFR, potenzialmente attraverso interazione diretta o effetti a valle. Riferimenti bibliografici: PMID:19088846
• Dopo l'endocitosi di TLR4, STAT1 viene fosforilato alla posizione Thr-749 da IKBKB, promuovendo la trascrizione di ARID5A e IL12B, collegando i segnali dell'immunità innata all'espressione genica infiammatoria. Riferimenti bibliografici: PMID:32209697
• Shuttle tra citoplasma e nucleo; l'importazione nucleare è strettamente regolata dallo stato di fosforilazione. Contiene il dominio SH2 conservato e il dominio di legame al DNA, caratteristico dei membri della famiglia STAT.
• È anche implicato nella tolleranza immunitaria intestinale: si associa al frammento p13 di Gasdermin-D per promuovere la trascrizione di CIITA e la differenziazione delle cellule Tr1 (per similarità).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico fosforilato corrispondente alla regione Y701 della STAT1 umana; si consiglia di utilizzare la competizione con peptide non fosforilato o il trattamento con fosfatasi per confermare la specificità per la fosforilazione nei vostri saggi.
• Per western blot, STAT1 migra a circa 87 kDa. Utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e convalidare le bande in condizioni riducenti.
• Nelle applicazioni ELISA, possono essere testati formati di rilevazione diretta o indiretta; un approccio comune consiste nel rivestire con peptide fosforilato e rilevare con un anticorpo secondario coniugato con HRP.
• Poiché l'attivazione di STAT1 dipende dallo stimolo, trattare le cellule con interferone (ad esempio IFN-alfa o IFN-gamma) per indurre la fosforilazione di Y701 prima della lisisi, per ottenere una rilevazione robusta.
• La reattività incrociata con uomo, topo e ratto è documentata; per altre specie, allineare la sequenza bersaglio intorno a Y701 per valutare la potenziale reattività.

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