Fosfo-Syk-Y323 Coniglio pAb per WB, IF/ICC - P43405

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Tirosina-chinasi proteica SYK

• La tirosina-chinasi proteica SYK (tirosina chinasi della milza, p72-Syk) è una tirosina chinasi non recettoriale che media la trasduzione del segnale a valle di una varietà di recettori transmembrana, inclusi i recettori immunitari classici come il recettore delle cellule B (BCR). Riferimenti correlati: PMID:12456653, PMID:15388330, PMID:34634301
• Attraverso i suoi due domini SH2, SYK si assembla in complessi di segnalazione con recettori attivati alla membrana plasmatica legandosi a domini ITAM fosforilati sulla tirosina, un processo spesso iniziato dalle chinasi della famiglia SRC.
• Nelle cellule B, SYK è essenziale per la maturazione durante la transizione da pro-B a pre-B e fosforila adattatori chiave come BLNK, nonché PLCG1 e BTK, per propagare la segnalazione BCR. Riferimenti correlati: PMID:12456653
• SYK svolge un ruolo cruciale nell'immunità innata mediando le risposte a patogeni fungini, batterici e virali, ad esempio tramite CLEC7A, portando alla produzione di ROS e all'attivazione dell'inflammasoma.
• Oltre ai recettori immunitari, SYK funziona a valle dei recettori di adesione cellulare, trasmettendo l'attivazione mediata dalle integrine dei neutrofili e dei macrofagi, ed è coinvolto nell'attivazione delle piastrine da parte del collagene e della podoplanina. Riferimenti correlati: PMID:12387735
• SYK regola diversi processi biologici tra cui la maturazione degli osteoclasti, lo sviluppo vascolare e la risposta immunitaria intestinale tramite la produzione di citochine mediata da NF-κB. Riferimenti correlati: PMID:12387735, PMID:33782605
• A livello subcellulare, SYK si trova alla membrana cellulare e nel citoplasma/citosol. È ampiamente espresso nelle cellule ematopoietiche, in particolare nei neutrofili e durante tutto lo sviluppo delle cellule B.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (il sito Y323 è critico per l'attivazione) e contiene domini SH2 e un dominio chinasi di legame dell'ATP.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un peptide specifico per la fosforilazione che circonda la tirosina 323 della SYK umana. La sequenza immunogena corrisponde a un sito di fosforilazione noto per regolare l'attivazione della SYK e la segnalazione a valle.
• Per un rilevamento ottimale della SYK fosforilata, includere inibitori delle fosfatasi in tutti i tamponi di lisi e di saggio per preservare lo stato di fosforilazione della proteina bersaglio.
• Il prodotto è raccomandato per WB e IF/ICC. In WB, è prevista una banda vicino a 72 kDa. Per IF/ICC, i passaggi di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzati per le localizzazioni di membrana e citosoliche del bersaglio.
• Si consiglia di validare l'anticorpo nel sistema di campione pertinente in condizioni in cui la fosforilazione della SYK è indotta (ad es., stimolazione del BCR) rispetto ai controlli non indotti per confermare la specificità.

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